1. 呵呵,我想知道抗生素培养基该怎么制备,怎么配。
抗生素的浓度是指最终在培养基中的浓度,所以你千万不能先配到100ug/ml抗生素溶液再加入。你可以先配到100 mg/ml浓溶液,过滤除菌,存于-20度,使用时以千分之一量加入培养基,比如100ml灭完菌的培养基加入100 ul的抗生素浓溶液。
记住,抗生素高温破坏,确保在60度以下时加入。
2. 抗生素如何灭菌
用那种针筒式的0.22μm的滤膜过滤即可,但要考虑配置抗生素的溶剂是有机的还是无机的,过滤用膜不能过滤乙醇!
注意在超净台分装时,别再染菌了,-20度保存
3. 对抗生素进行消毒除菌处理时,只能采用1. 煮沸法 2. 甲醛熏蒸 3. 过滤法 4. 高压蒸汽灭菌
选择2甲醛熏蒸,其余方法会对抗生素造成破坏
4. 用无水乙醇配制的红霉素需要过滤除菌吗
一般不需要除菌的,无水乙醇本来就不能长菌,如果一定要做过滤的操作的话,可以选用0.33μm的过滤器,用注射器装乙醇,然后通过过滤器过滤到已灭菌的容器里,当然,要在超净台里操作。这样就没问题了,一般抗生素,溶菌酶什么的都是这么过滤的。
5. 请问抗生素溶液用哪些方法灭菌乙醇溶液可以吗谢谢!
抗生素一般都是过滤灭菌,高压高温会导致抗生素失活,不同的抗生素需要不同的溶剂
6. 抗生素,培养基,谷氨酰胺灭菌方法
抗生素,培养基,谷氨酰胺灭菌方法为过滤除菌。
过滤除菌法(filtration) 是用物理阻留的方法将液体或空气的细菌除去,以达到无菌目的。所用的器具是含有微小孔径的滤菌器(filter)。主要用于血清、毒素、抗生素等不耐热生物制品及空气的除菌。常用的滤菌器有薄膜滤菌器(0.45μm和0.22μm孔径)、陶瓷滤菌器、石棉滤菌器(即Seitz滤菌器)、烧结玻璃滤菌器等。
7. 对于含有蛋白质或抗生素等物质的液体,需采用的除菌方法是
巴氏消毒法、添加抗生素,或其它可行的方法。
对于含有蛋白质的液体,如果要保持蛋白质的活性,则应当采用温和的消毒方式,例如巴氏消毒法、加入抗生素、适度辐照等。如果不考虑蛋白质的活性,或者蛋白质本身就应该失活,那么可采用高温高压消毒等。
对于含有抗生素的液体,应该加入其它类型的抑菌物质(例如液体中原本有喹诺酮类抗生素,可以再添加β-内酰胺类、大环内酯类抗生素等),可以让抗菌谱更广。当然也可以采用高温高压等方式。
在液体中加入苯酚、乙醇等方式消毒一般是不常用的,会极大地破坏液体本身的理化性质。
更多详细内容可参考周德庆编着的《微生物学教程》。
8. 急!抗生素溶液的配置问题
琼脂稀释法配制带药平板
如果是测试微生物的耐药性,可按以下步骤配制,如果只是用于筛选某些菌,只要配制好抗生素母液按照步骤(3)操作即可。
(1)抗生素药物溶液:按产品说明书配制各种抗生素药物原液,浓度应不低于1000μg/ml或10倍于最高测试浓度,除非药物的溶解度有影响。将原液对倍稀释形成浓度梯度,与培养基混合后的最终浓度可依次为512μg/ml,256μg/ml;128μg/ml;64μg/ml;32μg/ml;16μg/ml;8μg/ml;4μg/ml;2μg/ml;1μg/ml;0.5μg/ml;0.25μg/ml和0.125μg/ml。按实验室的具体需求选用适当的药物浓度范围。抗生素药物原液应贮存在-60℃或更低温度,保存期不超过6个月,期间需用标准质控菌株检测其效价。
(2)培养基:M-H琼脂为常规细菌药敏试验的最佳培养基,其pH应为7.2~7.4,用于葡萄球菌属对甲氧西林、苯唑西林和萘夫西林的耐药性检测则需添加2%NaCl。
(3)配制带药培养基:配制时加水量应减少1/10,以备添加稀释好的抗生素溶液。灭菌后水浴冷却至48~50℃,逐个将各个浓度的抗生素溶液以1:10加入M-H琼脂中,充分混匀,倾注平板,配制完成后于0~4℃保存,用于质控试验的平板保存期限为5天,用于常规试验的可略有延长。
一般不用考虑抗生素溶液的杂菌问题,不过如果有条件,可以采用膜过滤的方法过滤除菌,再用于带药平板的配制。
9. 培养基中加抗生素怎么灭菌
将培养基灭菌冷却到适宜温度后,再加入用微孔滤膜过滤的抗生素。
微孔滤膜一般微生物实验室应该都有,连接针管用的。
10. 含有抗生素的培养基如何灭菌抗生素高温会失活 急·····
琼脂稀释法配制带药平板
如果是测试微生物的耐药性,可按以下步骤配制,如果只是用于筛选某些菌,只要配制好抗生素母液按照步骤(3)操作即可。
(1)抗生素药物溶液:按产品说明书配制各种抗生素药物原液,浓度应不低于1000μg/ml或10倍于最高测试浓度,除非药物的溶解度有影响。将原液对倍稀释形成浓度梯度,与培养基混合后的最终浓度可依次为512μg/ml,256μg/ml;128μg/ml;64μg/ml;32μg/ml;16μg/ml;8μg/ml;4μg/ml;2μg/ml;1μg/ml;0.5μg/ml;0.25μg/ml和0.125μg/ml。按实验室的具体需求选用适当的药物浓度范围。抗生素药物原液应贮存在-60℃或更低温度,保存期不超过6个月,期间需用标准质控菌株检测其效价。
(2)培养基:M-H 琼脂为常规细菌药敏试验的最佳培养基,其pH应为7.2~7.4,用于葡萄球菌属对甲氧西林、苯唑西林和萘夫西林的耐药性检测则需添加2%NaCl。
(3)配制带药培养基:配制时加水量应减少1/10,以备添加稀释好的抗生素溶液。灭菌后水浴冷却至48~50℃,逐个将各个浓度的抗生素溶液以1:10加入M-H琼脂中,充分混匀,倾注平板,配制完成后于0~4℃保存,用于质控试验的平板保存期限为5天,用于常规试验的可略有延长。
一般不用考虑抗生素溶液的杂菌问题,不过如果有条件,可以采用膜过滤的方法过滤除菌,再用于带药平板的配制。