⑴ 液相色谱仪每针的出峰时间一针比一针晚。今天做实验时，标品前四针出峰时间相同，后几针就开始以0.1秒
原因分析：
1.你的流动相中有三乙胺或二乙胺等扫尾剂,应控制扫尾剂的用量,不要过量,严格按照标准方法配制.
2.含有扫尾剂的流动相平衡时间本身就很长,不建议每天都清洗色谱系统,可以采用在不工作的时候将废液管接回流动相瓶中低流量连续平衡色谱系统,减少每次工作的流动相平衡时间.
3.环境温度的影响也较大,应当使用柱温箱.
4.如果使用的是视差折光检测器,不但要使用柱温箱,连室温也要控制,避免人员在实验室频繁走动导致的温度变化.
5.你的检测器是否有温度控制,如果有建议与色谱柱采用相同的温度.
⑵ 配制100ML酸乳，需在鲜牛乳中加入10%乳酸多少毫升
你没有说出乳酸在100ML酸乳的比例，是多少；答案因此也就没有。10%只是乳酸纯度，不代表配置酸乳的纯度。
⑶ 用气相色谱能分开正己烷和正丁醇吗
测酒精含量吧白酒份十复杂掌握其几重要份（乙酸乙酯、丁酸乙酯、乳酸乙酯、酸乙酯等）含量指导勾酒师控制白酒品质同明白酒酿造工艺产些害物质（甲醇、杂醇油等）量使白酒产品真健康
采用DNP填充柱氢火焰离化检测器检测乙酸丁酯内标物定量白酒醇酯含量
测定组：乙醛、甲醇、乙酸乙酯、丙醇、仲丁醇、乙缩醛、异丁醇、丁醇、丁酸乙酯、异戊醇、戊酸乙酯、乳酸乙酯、酸乙酯
检测条件：柱温90℃、检测器135℃、汽化室135℃载气流量30ml/min采用内标定量
内标析,要求试必须存内标物,内标物与各组色谱峰能彼,并尽量接近预测组色谱峰
内标种间接或相校准析测定品某组含量加入种内标物质校谁消除于操作条件波析结产影响提高析结准确度
内标气相色谱定量析种重要技术使用内标品加入定量标准物质色谱拄所离受试其组峰干扰要测定内标物待测组峰面积与相响应值即求待测组品百含量采用内标定量内标物选择项十重要工作理想说内标物应能纯知化合物能准确、已知量加品应析品组基本相同或尽能致物理化性质(化结构、极性、挥发度及溶剂溶解度等)、色谱行响应特征析物质同系物色谱析条内标物必须能与品各组充离
影响内标测组峰高或峰面积比值素主要化面、色谱面仪器面三类
由化面原产面积比变化析重复品现
化面素包括：
1、内标物品混合；
2、内标物品组间发反应
3、内标物纯度变等
于比较熟说色谱面问题发能性更些色谱见些问题(渗漏)绝面积影响比较面积比影响则要些绝面积变化已足使面积比发显着变化程度定某重要色谱问题存比进量改变太品组浓度内标浓度间差别检测器非线性等进量应足够并保持变才致于造检测器积装置饱认比较靠色谱固看应着重检查积装置设置、斜率峰宽定位积装置发怀疑力证据：面积比变峰高比保持相恒定
制作内标标准曲线应注意?
用内标做色定量析先配制定重量比测组内标品混合物做色谱析测量峰面积做重量比面积比关系曲线曲线即标准曲线实际品析所采用色谱条件应尽能与制作标准曲线所用条件致制作标准曲线仅要注明色谱条件(固定相、柱温、载气流速等)应注明进体积内标物浓度制作内标标准曲线各点并完全落直线应求面积比重量比比值与其平均位标准偏差使用程应定期进行单点校若所值与平均值偏差于2曲线仍使用若于2则应重作曲线曲线铰短期内即产变则宜使用内标定量
欢迎追问
⑷ 高效液相色谱仪流动相为0.005mol/l的硫酸，这里的硫酸是不是只是调PH配制的时候要精确到用容量瓶定容吗
如果待测物质里面有弱的有机酸根（如乳酸、醋酸）等，硫酸的作用还可以将其变成游离酸进行检测。我以前测量有机酸的时候，使用的就是有机酸柱（偶尔用C18柱），流动相也是0.005M硫酸。
配置的时候需要用容量瓶，精确定容。
如果流动相的浓度不同，对锋面积可能会有影响。建议精确配置。
⑸ 液相色谱仪标品如何配制
请问你是配标样做标准曲线还是干什么用？要是做标准曲线，一般看你的样品好不好溶，好溶的话，配个浓度高的母液。一般我是称的时候抖一下，都出多少就多少，例如我称时抖出2.384mg的标样，我就加2.384ml的溶剂配成1mg/ml的母液，再稀释成六个等距的点就可以了，一般六个等距点后还要加一个最低检测线的点的，标准曲线的范围拉宽一点以后检测就不用稀释样品啦
⑹ 高效液相色谱如何根据出峰面积确定糖浓度
没有内外标理论上是测不出来的，但是如果你可以收集色谱柱分离后的所有样品，然后出去溶剂，就可以直接计算样品的质量。如果溶剂里面有盐，建议使用去盐柱(desalting column).如果不能收集样品，也没有海藻糖的标准样，建议使用和海藻糖具有相同发光团的糖作为标准样。
⑺ 饲料中乳酸含量如何测定
乳酸一般都是用液相色谱测，我测过青贮中的乳酸，但不知道饲料中的行不行，含量应该比较低吧？
⑻ 如何测定食品中的乳酸菌
菌种的分离 取lmL卤汁以10倍递增稀释方法（一份酸奶，九份无菌水，再取一份第一只管中溶液，加九份无菌水，依次类推），将其稀释至1/10～10的-10次幂（我打不上去），然后从不同浓度稀 释液中分别取lmL倾注在平皿中，再倒入培养基相混合，待培养基凝固后倒置于30~C恒温下 培养48h。挑取长势良好的单个茵落划线分纯，直至纯化(茵落单个大小一致，革兰氏染色镜 检，茵体一致)。结果分离得到3株不同菌株，分别编号为菌株1、菌株2、菌株3。再分别转移 到试管斜面上进行保存。 分离用培养基：牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，蒸馏水1 000 mL，琼脂20g，pH7．0—7．2 ；保存用斜面培养基：酵母膏1％ ，碳酸钙2％ ，葡萄糖1％ ，琼脂2％ ，pH 7．0。 培养条件 将分离出的菌株1、菌株2、菌株3分别接种在上述4种不同的培养基上， 在30。【=恒温条件下培养48h后观察并测定其培养结果。 测定方法 菌落总数采用逐级稀释法来计数；pH值用pHS一2C酸度计测定；乳酸定性 及含量测定依据食品检验技术 1I．2．1乳酸菌的分离与筛选的试验程序 自然发酵酸奶---稀释---培养---挑起单菌落染色、镜检一挑 选革兰氏阳性球菌单菌落一Ⅲ号培养基一挑选溶钙圈大的球菌反复在Ⅲ号培养基上几次纯化筛选一单菌落优 良菌株一试管穿刺低温保存。 1．2 1．2 乳酸菌的鉴定 用光学显微镜、放大镜进行乳酸菌的形态特征鉴定。生理生化特征鉴定：产乳 酸定性试验——乳酸纸层析法0- 、过氧化氢酶(接触酶)反应�6�8、明胶水解反应 、硫化氢反应 、乳酸菌 发酵营养型试验0 、耐盐、酸、温度试验。 1．2．I．3 乳酸菌的保存�6�8 采用定期移植低温保藏法。培养基配方：葡萄糖1％ 、蛋白胨0 2％ 、 l(}l2PQ|0．2％、琼脂20％、pH值7 0，分装试管，121。c灭菌30min。将使用对数生长期后期的细胞进行穿刺 培养，然后密封存于冰箱玲藏室内(5qc左右)，2个月移植1次。 1．2．2 分离乳酸菌的生理特点试验 1 2 2．1 最适生长温度的测定OD值以同温下不接种培养基作对照，定期取出接种培养基在721分光光度 计上，用最大吸收光波长 =6001RIifl测定。 1．2．2．2 生长周期的测定oD值(方法同上)；pH值：PHB一4pH计；可滴定酸(以乳酸计)：吸取ImL菌液 加入9Ⅱ1L蒸馏水，加入1～2滴酚酞，用0．1NNaOH滴定。 1．2 2．3 最适pH值的测试、最适盐浓度的测试。 供试样品及培养基 分离用样品：酸奶、酸奶及西红柿均为市售 分离用培养基：①BCP培养基：酵母膏2 5g，蛋白胨5g，葡萄糖5g，溴甲酚紫0 04g，琼脂15g， 蒸槽水lO00ml，pH7 0；②MRS培养基见文献 。 菌种保藏用培养基：脱脂乳培养基：新鲜牛乳离心去掉上层乳脂，下层奶液分装试管，105℃ 灭菌20mln。 菌利 鉴定用培养基见文献 6。 1 2 方法 1 2 1 乳酸菌的分离纯化 取泡菜汁、酸奶、西红柿表面洗液进行梯度稀释，分别用倾注法、涂布 法和划线法在BCP和MRS培养基平板上进行菌种分离。挑取在BCP平板上有透明目的菌落，在 MRS平扳上有溶钙圈的菌落，反复纯化至纯种，挑菌至脱脂牛奶试管中保存 1．2 2 乳酸菌复筛对初筛菌株进行革兰氏染色，保留革兰氏阳性菌株．并对其所产乳酸能力进 行定性、定量分析，筛选出产酸高的菌株保存，再把产酸高的菌株经萝l、汁发酵 】，进一步选择产 酸高、_l】味纯正的菌株保存鉴定 1 2 3 乳酸定性测定果用纸层析法。溶剂系统为乙醇：浓氨水：水=80：5：15，显色剂为0 04％ 的溴甲酚紫酒精溶液。层析时将乳酸、柠檬酸配成1％ 的标准溶液，两种标准溶液 及乳酸发酵液 均点样3 ．上行层析，显色与标准样比较 1．2 4 乳酸的定量测定采用气相色谱法，利用苄酯化法制备乳酸衍生物，将待测乳酸菌株在产 酸培养基内37"C培养3d，离心。取上清液剃备衍生物，气相色谱分析含量。气相色谱工作条件为： EGS色谱柱，柱温160'C，气化温度180'17．，检测器温度l70"C，载气为N，。 1．2 5 菌种鉴定根据《简明第八版伯杰细菌鉴定手册》 和《一般细菌常用鉴定手册》[6 对复筛 出的菌株的形态、生理生化、碳源利用等方面进行系统鉴定，并提取乳酸菌株DNA，采用熔链温度 .
⑼ 液相色谱中混标应当如何跑定了标品的方法时，如果样品中有小杂峰与特征峰没有分开怎么办
你先弄少量的每种标样，每针在此流动相下走，定性分析一下其保留时间，以确定将来出峰那个峰是那种物质。杂峰分不开可以换个长柱子，你用的是150的还是250的？或者调整流动相比例将其拽开。
⑽ 乳酸怎么在液相色谱中出峰
如果液相色谱用的是紫外检测的话就出不了，必须有共轭结构才有紫外吸收。可以考虑用气相色谱或者气质联用。