Ⅰ western blot 里5%skim milk怎么配
最近作了两次Western blot，不但没阳性结果，显色背景都没有，电泳和转膜都染过，有条带。底片和显色液及DAB显色液均试过，没问题。1、检测GAD--分子量67kd，提取液有蔗糖，其余同三去污裂解液。蔗糖不会有影响把?样本--20度放置一周内测。2、一抗放置2年，可能效价不高!用的是 1:100。如果是一抗的原因，不会背景都没有把?3、第一次有不均匀背景，因为一抗过夜时密封袋不均匀。后两次无背景显色。4、封闭液用的是含15%脱脂奶粉TBST，漂洗液用的是含1%BSA的TBST液，TWEEN-20为 0.1%，不会是封闭液的问题吧?
可以在下面几个问题上找找原因。1. 封闭液用5%Milk，漂洗液(washing buffer 用TBST)2. 看看一抗是否能work，降到1：20。3. 看看二抗是否有问题。
Ⅱ elisa封闭液怎么配
推荐用tbst进行稀释获得5%的牛奶封闭液（5g/100ml）。
很多人的经验是：脱脂牛奶封闭后背景比较干净，而检测磷酸化蛋白则用bsa（因脱脂牛奶含有较多的磷酸化蛋白，会干扰的）
Ⅲ 奶粉一勺5克左右,水比例1比7,那水要多少毫升
要35毫升。按要求5克奶粉按1:7比倒需水35克，水的比重是1克/亳升，正好35毫升。
Ⅳ 配wb脱脂奶粉封闭液是用tbst还是tbs
用加脱脂奶粉封闭液用TBST液显色用红外荧光二抗则能用TBS液稀释
Ⅳ southern blot 牛奶封闭液如何配置
Southern Blot 为什么要配牛奶封闭液啊？是最后孵育的一部要加抗体吗？
如果是封闭抗体的话，一般就配5%的脱脂奶粉，5%多半指的是个g/100ml。也就是5g奶粉，100ml水的比例，完全溶解即可。如果担心牛奶里面有小颗粒没有溶解，可以用0.22um的膜过滤一下，防止有颗粒在膜上形成斑点的背景。
Ⅵ western牛奶封闭液怎么配
推荐用TBST进行稀释获得5%的牛奶封闭液（5g/100mL）。
拓展：
一、牛血清白蛋白(BSA)，又称第五组分，是牛血清中的一种白蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为66.430 kDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用，例如在western blot中作为Blocking agent;在酶切反应缓冲液中加入BSA，通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附，能减轻有些酶的变性，能减轻有些不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性。
二、用途说明
1、 在酶切反应缓冲液中加入BSA，通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附，能减轻有些酶的变性，减轻不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性的。
2 、ELISA中也常常用到，比如封闭液，样本稀释液，酶结合物稀释液都可以用BSA。
3、生化研究，遗传工程和药物研究。
Ⅶ 5量匙奶粉是约几勺、加180毫升的水美素佳儿
您好，一般来说的话 ，大多数奶粉是一平勺加30毫升的水的 ，但是具体的还是需要看罐体上面的喂养说明的哦