1. 生根培养基配置方法
（1）配制MS大量元素母液 一般将大量元素分别配制成100倍的母液,使用时再分别稀释100倍. 分别称取 NH4NO3 165g KH2PO4 17g KNO3 190g CaCl2·2H2O 44g MgSO4·7H2O 37g 各自配成1L的母液.倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中. （2）配制MS微量元素母液 一般将微量元素配制成100倍母液. 依次称取 KI 0.083g Na2MoO4·2H2O 0.025g H3BO3 0.62g CuSO4·5H2O 0.0025g MnSO4·H2O 1.69g CoCl2·6H2O 0.0025g ZnSO4·7H2O 0.86g 配成1L母液,倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中. CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O 由于称取量很小,如果天平精确度没有达到万分之一,可先配成调整液. 分别称取 CuSO4·5H2O 0.05g CoCl2·6H2O 0.05g 各自配成100ml的调整液,然后取5ml就还有0.0025g的量. （3）配制MS有机母液 一般配制成100倍MS有机母液. 依次称取 肌醇 10g 盐酸硫胺素（VB1） 0.01g 烟酸 0.05g 甘氨酸 0.2g 盐酸吡哆醇（VB6） 0.05g 配成1L母液,倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中. （4）配制MS铁盐母液 一般配制成100倍MS铁盐母液. 依次称取 EDTA二钠 3.73g FeSO4·7H2O 2.78g 配成1L母液,倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中. 所以MS母液有5种大量元素母液,加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐母液,共8种母液. 激素母液的配制 各种生长素和细胞分裂素要单独配制,不能混合在一起,生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的NaOH溶解,细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解,然后再加蒸馏水定容.一般取100mg配成100ml母液. 2、配制培养基 以配置1L MS培养基为例,按顺序进行如下操作： （1）先在烧杯中放入一些蒸馏水. （2）分别取上面八种母液10ml倒入. （3）一般称取30g蔗糖倒入,搅拌溶解. （4）加蒸馏水用量筒定溶至1L. （5）按设计好的方案添加各种激素,由于激素的用量很小,而且激素对组培植物的生长至关重要.所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取,减少误差. （6）用精密试纸或酸度计调整PH至5.7-5.8.（有条件的话使用酸度计,比较精确） 可配1当量的HCL和1当量的NaOH用来调溶液PH值. 1当量HCL配制：用量筒量取8.3ml配成100ml溶液. 1当量NaOH配制：称取NaOH 4g 配成100ml溶液. （7）称取5g左右琼脂粉（质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中,放在电炉上加热至沸腾,直到琼脂粉熔化. （8）稍微冷却后,分装入培养容器中.无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口,用橡皮筋或绳子扎紧. （9）放入消毒灭菌锅灭菌,灭菌20分钟左右. （10）灭菌后从灭菌锅中取出培养基,平放在实验台上令其冷却凝固.
二、灭菌
灭菌是组织培养重要的工作之一.初学者要清楚有菌和无菌的范畴.有菌的范畴是：凡是暴露在空气中的物体,接触自然水源的物体,至少它的表面都是有菌的.依此观点,无菌室等未处理的地方、超净台的表面、简单煮沸的培养基、我们使用的刀、剪在未处理之前、我们身体的整个外表及与外界相连的内表,如整个消化道、呼吸道,即我们呼出的气体、培养容器无论洗得多干净等等都是有菌的. 这里所指的菌,包括细菌、真菌、放线菌、藻类及其他微生物.菌的特点是：极小,肉眼看不见.无处不在,无时不有,无孔不入.在自然条件下忍耐力强,生活条件要求简单,繁殖力极强,条件适宜时便可大量滋生. 无菌的范畴是：经高温灼烧或一定时间蒸煮过后的物体,经其他物理或化学的灭菌方法处理后的物体（当然这些方法必须已经证明是有效的）,高层大气、岩石内部、健康的动、植物的不与外部接触的组织内部,强酸强碱,化学元素灭菌剂等表面和内部都是无菌的.从以上可以看出：在地球表面无菌世界要比有菌世界小的多. 灭菌是指用物理或化学的方法,杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体,即把所有生命的物质全部杀死.与此相关的一个概念是消毒,它指杀死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再发生危害作用,显然经过消毒,许多细菌芽孢、霉菌厚垣孢子等不会完全杀死,即由于在消毒后的环境里和物品上还有活着的微生物,所以通过严格灭菌的操作空间（接种、超净台等）和使用的器皿,以及操作者的衣着和手都不带任何活着的微生物.在这样的条件下进行的操作,就叫做无菌操作. 植物组织培养对无菌条件的要求是非常严格的,甚至超过微生物的培养要求,这是因为培养基含有丰富的营养,稍不小心就引起杂菌污染.要达到彻底灭菌的目的,必须根据不同的对象采取不同的切实有效的方法灭菌,才能保证培养时不受杂菌的影响,使试管苗能正常生长. 常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类,即：物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或高压蒸煮）、射线处理（紫外线、超声波、微波）、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施；化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理.这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用. 1、培养基用湿热灭菌 培养基在制备后的24小时内完成灭菌工序.高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加.在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃.在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢. 注意完全排除锅内空气,使锅内全部是水蒸气,灭菌才能彻底.高压灭菌放气有几种不同的做法,但目的都是要排净空气,使锅内均匀升温,保证灭菌彻底.常用方法是：关闭放气阀,通电后,待压力上升到0.05MPa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气阀. 关阀再通电后,压力表上升达到0.1MPa时,开始计时,维持压力0.1-0.15MPa,20分钟. 按容器大小不同,保压时间有所不同,见表.该表所列数字是彻底灭菌很保险的数字,如果容器体积较大,但是放置的数量很少,也可以减少时间.
三、接种
接种时由于有一个敞口的过程,所以是极易引起污染的时期,这一时期主要由空气中的细菌和工作人员本身引起,接种室要严格进行空间消毒.接种室内保持定期用1%-3%的高锰酸钾溶液对设备、墙壁、地板等进行搽洗.除了使用前用紫外线和甲醛灭菌外,还可在使用期间用70%的酒精或3%的来苏儿喷雾,使空气中灰尘颗粒沉降下来.无菌操作可按以下步骤进行： （1）在接种4小时前用甲醛熏蒸接种室,并打开其内紫外线灯进行杀菌； （2）在接种前20分钟,打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯； （3）接种员先洗净双手,在缓冲间换好专用实验服,并换穿拖鞋等； （4）上工作台后,用酒精棉球搽拭双手,特别是指甲处.然后搽拭工作台面； （5）先用酒精棉球搽拭接种工具,再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍,然后反复过火尖端处,对培养皿要过火烤干； （6）接种时,接种员双手不能离开工作台,不能说话、走动和咳嗽等； （7）接种完毕后要清理干净工作台,可用紫外线灯灭菌30分钟,若连续接种,每5天要大强度灭菌一次. 接种是将已消毒好的根、茎、叶等离体器官,经切割或剪裁成小段或小块,放入培养基的过程.现将接种前后的程序连贯地介绍. 无菌接种步骤： （1）将初步洗涤及切割的材料放入烧杯,带入超净台上,用消毒剂灭菌,再用无菌水冲洗,最后沥去水分,取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上. （2）材料吸干后,一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀,对材料进行适当的切割.如叶片切成0.5cm平方的小块；茎切成含有一个节的小段.微茎尖要剥成只含1-2片幼叶的茎尖大小等.在接种过程中要经常灼烧接种器械,防止交叉污染. （3）用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上.具体操作过程（以试管为例）是：先解开包口纸,将试管几乎水平拿着,使试管口靠近酒精灯火焰,并将管口在火焰上方转动,使管口里外灼烧数秒钟.若用棉塞盖口,可先在管口外面灼烧,去掉棉塞,再烧管口里面.然后用镊子夹取一块切好的外植体送入试管内,轻轻插入培养基上.若是叶片直接附在培养基上,以放1-3块为宜.至于材料放置方法除茎尖、茎段要正放（尖端向上）外,其他尚无统一要求.接种完后,将管口在火焰上再灼烧数秒种.并用棉塞,塞好后,包上包口纸,包口纸里面也要过火.
四、培养
培养指把培养材料放在培养室（有光照、温度条件、无菌）里,使之生长,分裂和分化形成愈伤组织或进一步分化成再生植株的过程. 1、培养方法 （1）固体培养法 即用琼脂固化培养基来培养植物材料的方法.是现在最常用的方法.虽然该方法设备简单,易行,但养分分布不均,生长速度不均衡,并常有褐化中毒现象发生. （2）液体培养法 即用不加固化剂的液体培养基培养植物材料的方法.由于液体中氧气含量较少,所以通常需要通过搅动或振动培养液的方法以确保氧气的供给,采用往复式摇床或旋转式摇床进行培养,其速度一般为50-100r/min,这种定期浸没的方法,既能使培养基均一,又能保证氧气的供给.
2. 如何配置ms培养基
嗯，你的题目跟叙述根本不是一个问题哈。如果你是要配置如叙述的少于1L体积的培养基，IAA是不能跟培养基其他成分一起高压灭菌的，可以单独配置成10X浓度的原液用0.22的膜过滤除菌，然后待已灭菌培养基温度减到IAA稳定耐受的温度后取XXml配制好的IAA加入培养基就可以了。
如果如你题目需要配制的是IAA梯度浓度的培养基，需要另外有混悬搅拌器和蠕动泵根据计算调好流速进行配制。
3. MS培养基配方的配制步骤
这样每次使用时，取其总量的1/20（50 mL）或1/200（5 mL），加水稀释，制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。
大量元素（母液Ⅰ） mg/L
NH4NO333 000
KNO338 000
CaCl2·2H2O8 800
MgSO4·7H2O 7 400
KH2PO4 3 400
微量元素（母液Ⅱ）
KI 166
H3BO3 1 240
MnSO4·4H2O 4 460
ZnSO4·7H2O 1 720
Na2MoO4·2H2O 50
CuSO4·5H2O 5
CoCl2·6H2O 5
铁盐（母液Ⅲ）
FeSO4·7H2O5 560
Na2-EDTA·2H2O 7 460
有机成分（母液Ⅳ）ⅣA
肌醇20 000
ⅣB烟酸100
盐酸吡哆醇（维生素B6） 100
盐酸硫胺素（维生素B1） 20
甘氨酸 400
以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。
上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。其中，
母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。
母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。
MS培养基中还需要加入：2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、萘乙酸(NAA）、6-苄基嘌呤（6-BA）等植物生长调节物质，并且分别配成母液（0?1 mg/mL）。其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量（1 mL）无水乙醇预溶，将6-BA用少量（1 mL）的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0.1 mg/mL的母液。
配制培养液 用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量：母液Ⅰ为50 mL，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2，4-D 5 mL、NAA 1 mL，与各种母液一起放入烧杯中。
4. 培养基怎么配置
（1）配制母液。把培养基m的必需元素按原配方量的50倍/100倍或1000倍称量后制成一种浓溶液，这种浓溶液叫母液在配制培养基时按比例分别量取母液稀释到所需的浓度即可母液配好后贴上标签，放在0～4℃的冰箱中可使用半年到1年，这样傲可节省许多时间可能产生化学反应的或溶解后产生沉淀的不能放在同一个容器m配制母液要用重蒸馏水药物要使用分析纯或等级较高的化学纯药物的称量和药液的定容都要准确。
母液①：硫酸镁18.5克．硝酸铵82.5克．硝酸钾95.0克；加水定容到1000毫升，浓度为培养基的50倍，配1升培养基时量取20毫升母液
母液②：氯化钙22.0克加水定容到500毫升，浓度为培养基的100倍，配1升培养基时量取10毫升母液
母液③：磷酸二氢钾8.5克加水定容到500毫升，浓度为培养基的100倍，配1升培养基时量取10毫升母液。
母液④；乙二胺四乙酸二钠3.73克硫酸亚铁2.78克，加水定容到1000毫升，浓度为培养基的100倍，配1升培养基时量取10毫升母液
母液⑤：硼酸620毫克，硫酸锰2230毫克，硫酸锌860毫克，硫酸铜2.5毫克，碘化钾83毫克，钼酸钠25毫克，氯化钴2.5毫克，加水定容到1000毫升，浓度为培养基的100信，配1升培养基时量取10毫升母液。
母液⑥：肌醇5克，甘氨酸100毫克，烟酸25毫克，盐酸吡哆醇25毫克，盐酸硫胺素5毫克，加水定容到500毫升，浓度为培养基的100倍，配1升培养基时量取10毫升母液
（2）配制培养基。配制每1000毫升培养基．称取6～10克琼：脂作凝固剂，具体按配方要求称量，放在水浴锅上慢慢溶解，先在量筒内放入一定量的水，按照母液顺序和规定量，量取母液，当母液加完后，根据需要每升培养基再加入生长调节物质如吲哚乙酸或萘乙酸等，细胞分裂素类0.04～10毫克，细胞分裂素应用最多的是6-苄基腺嘌呤，加完后倒入已熔化的琼脂中，每1000毫升培养基加入蔗糖30克或根据要求确定，定容到所需的体积，继续加温，直到琼脂完全熔解，用盐酸或氢氧化钠对培养基的pH进行调节，多数培养基的pH在5．4～6.0，MS培养基的pH为5.7。
将配好的培养基趁热倒入培养容器中，培养基占容器体积的1／4～1／3不要将培养基沾到容器壁上，否则容易被杂菌感染，然后及时加盖，进行高压灭菌，灭菌时要按高压灭菌锅的操作规程使用．在121℃、压力111千帕下维持15～20分钟，温度和时间都要严格控制，到时间后立即切断电源，当高压锅内压力降到常压后，开启放气阀，打开锅盖，取出灭菌好的培养基，放在接种室中培养3天，没被感染后才能用来组织培养
5. 培养基母液配制的方法如何
配制培养基是花卉组织培养的首要环节。培养基的成分随着花卉的种类、不同的外植体、不同的培养阶段应当有所不同。一般来说，各种培养基都有大量元素、微量元素、维生素、激素、糖和琼脂等物质，有时还要在培养基里添加有机附加物，如活性炭、香蕉汁、椰子汁等。在生产上，首先选用已有的培养基配方，它是前人研究的成果，又是经过生产实践验证的。现在几乎各种花卉用的营养基配方都有，可以免去您再研究的麻烦，当然在生产实践中，也可适当改进。如果您找不到合适的配方，可先试用MS培养基，MS是Murashige和Skoog的缩写，他们二人于1962年研究出来了这种培养基。下面以MS培养基为例，介绍怎样配制。
（1）配制母液。把培养基中的必需元素按原配方量的50倍、100倍或1000倍称量后制成一种浓溶液，这种浓溶液叫母液。在配制培养基时按比例分别量取母液稀释到所需的浓度即可。母液配好后贴上标签，放在0～4℃的冰箱中，可使用半年到1年，这样做可节省许多时间。可能产生化学反应的或溶解后产生沉淀的，不能放在同一个容器中。配制母液要用重蒸馏水。药物要使用分析纯或等级较高的化学纯。药物的称量和药液的定容都要准确。
母液①：硫酸镁18.5克，硝酸铵82.5克，硝酸钾95.0克。加水定容到1000毫升，浓度为培养基的50倍，配1升培养基时量取20毫升母液。
母液②：氯化钙22.0克。加水定容到500毫升，浓度为培养基的100倍，配1升培养基时量取10毫升母液。
母液③：磷酸二氢钾8.5克。加水定容到500毫升，浓度为培养基的100倍，配1升培养基时量取10毫升母液。
母液④：乙二胺四乙酸二钠3.73克，硫酸亚铁2.78克。加水定容到1000毫升，浓度为培养基的100倍，配1升培养基时量取10毫升母液。
母液⑤：硼酸620毫克，硫酸锰2230毫克，硫酸锌860毫克，硫酸铜2.5毫克，碘化钾83毫克，钼酸钠25毫克，氯化钴2.5毫克。加水定容到1000毫升，浓度为培养基的100倍，配1升培养基时量取10毫升母液。
母液⑥：肌醇5克，甘氨酸100毫克，烟酸25毫克，盐酸吡哆醇25毫克，盐酸硫胺素5毫克。加水定容到500毫升，浓度为培养基的100倍，配1升培养基时量取10毫升母液。
（2）配制培养基。配制每1000毫升培养基，称取6～10克琼脂作凝固剂，具体按配方要求称量，放在水浴锅上慢慢溶解。先在量筒内放入一定量的水，按照母液顺序和规定量，量取母液。当母液加完后，根据需要每升培养基再加入生长调节物质如吲哚乙酸或萘乙酸等，细胞分裂素类0.04～10毫克，细胞分裂素应用最多的是6-苄基腺嘌呤，加完后倒入已熔化的琼脂中。每1000毫升培养基加入蔗糖30克或根据要求确定，定容到所需的体积。继续加温，直到琼脂完全熔解。用盐酸或氢氧化钠对培养基的pH进行调节，多数培养基的pH在5.4～6.0之间，MS培养基的pH为5.7。
将配好的培养基趁热倒入培养容器中，培养基占容器体积的1/3～1/4。不要将培养基沾到容器壁上，否则容易被杂菌感染。然后及时加盖，进行高压灭菌，灭菌时要按高压灭菌锅的操作规程使用。在121℃、压力111千帕下维持15～20分钟，温度和时间都要严格控制。到时间后立即切断电源，当高压锅内压力降到常压后，开启放气阀，打开锅盖，取出灭菌好的培养基，放在接种室中培养3天，没被感染后才能用来组织培养。
6. MS培养基的配方表
ms培养基ms培养基配方mg/l
大量元素：nh4no3
1
650
kno31
900
cacl2·2h2o
440
mgso4·7h2o
370
kh2po4
700
微量元素：ki
0.83
h3bo3
6.2
mnso4·4h2o
22.3
znso4·7h2o
8.6
na2mno4·2h2o
0.25
cuso4·5h2o
0.025
cocl2·6h2o
0.025
feso4·7h2o（27.8）+na2-edta·2h2o（37.3）
有机成分：肌醇
100
烟酸
0.5
盐酸吡哆醇（维生素b6）
0.5
盐酸硫胺素（维生素b1）
0.5
甘氨酸
2
注意：肌醇一般是要另外分开来独自配成浓缩液，因为它比较难溶，一般配成100倍，而除去肌醇后的有机，还是可以配成1000倍的。
[编辑本段]注意事项：1.母液ⅱ及母液ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1
l。
2.母液ⅲ的配制方法是：将称好的feso4·7h2o和na2-edta·2h2o分别放到450
ml蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将ph调至5.5，最后定容到1
l，保存在棕色玻璃瓶中。
3.ms培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-d)、萘乙酸(naa)、6
苄基嘌呤(6ba)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0
1
mg/ml)。其配制方法是：分别称取这3种物质各10
mg，将2，4-d和naa用少量(1
ml)无水乙醇预溶，将6ba用少量(1
ml)的物质的量浓度为0.1
mol/l的naoh溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100
ml，即得质量浓度为0
1
mg/ml的母液。