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1木聚糖溶液怎么配置

发布时间: 2022-07-08 04:04:36

① 关于酶活力计算

关于酶活力的计算?有两个厂家,给我分别提供了他们的酶活力定义:1. 在XX条件下,一个小时分解木聚糖溶液生成1umol 木糖,酶活是20万u2. 在XX条件下,一分钟分解木聚糖溶液生成1umol 木糖
关于酶活力的计算?
有两个厂家,给我分别提供了他们的酶活力定义:
1. 在XX条件下,一个小时分解木聚糖溶液生成1umol 木糖,酶活是20万u
2. 在XX条件下,一分钟分解木聚糖溶液生成1umol 木糖,酶活是2000万u
请问是不是2的酶活是1的6000倍?
另外,为什么有的木聚糖酶是在37度条件下最佳,有的在50度。
现在最好的木聚糖酶是什么菌株发酵的?
是商业机密吗?

② 低聚木糖糖浆的做法

本发明涉及将玉米芯中的半纤维素转化为低聚木糖的方法,属食品加工领域。
低聚木糖亦称木寡糖(xylooligosaccharides),由2~7个D-木糖以β-1,4-木糖苷键结合而成,是功能性低聚糖家族中的一个重要成员。它的甜度比蔗糖和葡萄糖均低,与麦芽糖差不多,约为蔗糖的40%。低聚木糖对pH值及热的稳定性较好,即使是在酸性条件(pH=2.5~7)加热也基本不分解,适合用于酸奶、乳酸菌饮料和碳酸饮料等酸性饮料中。下图为低聚木糖的主要成分及化学结构。

低聚木糖极难被消化吸收,肠道内残存率高,具有极好的双歧杆菌增殖性,其选择利用性高于其它功能性低聚糖。目前业已研究确认的低聚木糖的生理功能主要包括(1)提供较低的能量,满足喜食甜品又担心发胖者的要求,还可供糖尿病人、肥胖病人和高血压病人食用;(2)活化肠道内双歧杆菌并促进其增殖,抑制病原菌,防止腹泻;(3)防止便秘;(4)降低血清中胆固醇含量、降低血压、生成营养物质、增强机体免疫力和抵抗肿瘤;(5)不会引起龋齿,有利于口腔健康;(6)清除肠内毒素。
低聚木糖一般是以富含木聚糖的植物资源,如木屑、玉米芯、棉籽壳、稻壳和菜籽壳等为原料,经过内切型木聚糖酶水解后,再进行分离、精制而制得。我国玉米芯资源丰富,但关于从玉米芯中提取低聚木糖的方法却未见报导。
本发明的目的是要提供一种用玉米芯做原料的低聚木糖的制备方法。
为了达到本发明的目的所采取的技术方案包括采用碱金属氢氧化物溶液预处理玉米芯粉、水洗、玉米芯粉中木聚糖的溶出、木聚糖酶水解反应及低聚木糖溶液的脱色、除杂、浓缩及干燥技术,其中(1)玉米芯粉预处理所采用的碱金属氢氧化物溶液为氢氧化钾、氢氧化钠等溶液,预处理时,碱金属氢氧化物溶液的浓度为0.5%~1.5%,处理温度30℃~60℃,时间30min~120min,玉米芯粉与碱金属氢氧化物溶液重量比为1∶8~1∶12;(2)玉米芯粉中木聚糖的溶出采用直热蒸煮裂解方式,蒸煮温度为155℃~180℃,蒸煮时间30min~120min,玉米芯粉与水的重量比为1∶6~1∶10,蒸煮过程中使用弱酸型催化剂如乙酸、甲酸、柠檬酸等,添加量为玉米芯粉重量的0.2%~1.5%;(3)酶水解反应使用的是sp.E-86型木聚糖酶液,酶水解反应温度45℃~60℃,酶水解反应时间4h~10h,木聚糖酶液与玉米芯粉的比为1ml/1.2g~1ml/1.6g,木聚糖酶液酶活性为50UI/ml~70UI/ml;(4)低聚木糖溶液的脱色采用活性炭粉,具体条件为脱色温度80℃,活性炭与糖液的体积比为0.5%~1.5%,脱色时间25min~40min;(5)低聚木糖溶液采用强酸型阳离子树脂如E306FG及大孔弱碱型阴离子交换树脂如D001进行除杂。
上述的低聚木糖的制备方法中,玉米芯粉预处理所用最佳碱金属氢氧化物为氢氧化钠,最优浓度为0.7%,最优温度为55℃,最优处理时间为60min,最佳料液重量比为1∶10。
上述的低聚木糖的制备方法中,玉米芯粉进行直热蒸煮裂解时,最佳蒸煮温度为165℃,蒸煮时间120min,最佳催化剂为乙酸,添加量为玉米芯粉重量的0.5%。
上述的低聚木糖的制备方法中,木聚糖酶水解反应最佳温度为55℃,反应时间8h,木聚糖酶液与玉米芯粉的比为1ml/1.45g,木聚糖酶液酶活性为60UI/ml。
上述的低聚木糖制备方法的脱色过程中,活性炭与糖液的最佳体积比为1%,脱色时间30min。

③ 木聚糖溶液是什么颜色

一)苯酚法测定可溶性糖 【实验原理】 植物体内的可溶性糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。苯酚法测定可溶性糖的原理是:糖在浓硫酸作用下,脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物,在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比,且在485nm波长下有最大吸收峰,故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定,方法简单,灵敏度高,实验时基本不受蛋白质存在的影响,并且产生的颜色稳定160min以上。 【实验仪器及试剂】 1.仪器:分光光度计、电炉、铝锅、20mL刻度试管、刻度吸管、记号笔、吸水纸适量。 2.试剂: (1)90%苯酚溶液:称取90g苯酚(AR),加蒸馏水10mL溶解,在室温下可保存数月。 (2)9%苯酚溶液:取3mL 90%苯酚溶液,加蒸馏水至30mL,现配现用。 (3)浓硫酸(比重1.84)。 (4)1%蔗糖标准液:将分析纯蔗糖在80℃下烘至恒重,精确称取1.000g。加少量水溶解,移入100mL容量瓶中,加入0.5mL浓硫酸,用蒸馏水定容至刻度。 (5)100ug/L蔗糖标准液:精确吸取1%蔗糖标准液1mL加入100mL容量瓶中,加水定容。 【实验步骤】 1.标准曲线的制作: 取20mL刻度试管11支,从0-10分别编号,按表27-1加入溶液和水,然后按顺序向试管内加入1mL 9%苯酚溶液,摇匀,再从管液正面以 5-20s。加入5 mL浓硫酸,摇匀。比色液总体积为8 mL,在恒温下放置30min。显色。然后以空白为参比,在485nm波长下比色测定,以糖含量为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线,求出标准直线方程。 2.可溶性糖的提取 取新鲜植物叶片,擦净表面污物,剪碎混匀,称取0.10-0.30g,共3份,分别放入3支刻度试管中,加入5-10mL 蒸馏水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液过滤入25mL容量瓶中,反复冲洗试管及残渣,定容至刻度。 3.测定吸取0.5mL样品液于试管中(重复2次),加蒸馏水1.5mL,同制作标准曲线的步骤,按顺序分别加入苯酚、浓硫酸溶液,显色并测定光密度。由标准线性方程求出糖的量,按下式计算测试样品中糖含量。 式中:C一标准方程求得糖量(ug) α一吸取样品液体积(mL) V-提取液量(mL) n一稀释倍数 W一组织重量(g) 可溶性糖含量(%)=从标准曲线查得糖的量(μg)×提取液体积(ml)×稀释倍数/[测定用样品液的体积(ml)×样品重量(g)×106]×100

④ 土壤木聚糖酶

木聚糖酶活性测定方法
(规范性附录)

A 1 方法原理
样品的木聚糖酶对底物——燕麦木聚糖进行水解,用DNS(3,5-二硝基水杨酸)试剂分光光度法测定水解所产生的还原糖量。
A 2 活性单位定义
在温度为50℃,pH 5.3条件下,1s内从燕麦木聚糖中产生1nmol木糖所需的酶量,为1个木聚糖酶的活性单位(BXU)。
A 3 应用范围
本法用于来源于曲霉属(Aspergilious)或木霉属(Trichoderma)的木聚糖酶样品的测定。当分析其它来源的酶时,该法的线性需要校正。本法适用于各种含有木聚糖酶的产品。
A 4 测定条件
A 4.1 底物: 燕麦木聚糖
A 4.2 pH: 5.3
A 4.3 温度: 50℃±0.5℃
A 4.4 保温时间: 5min
A 5 仪 器
A 5.1 超级恒温水浴锅:50℃
A 5.2 水浴锅: 100℃
A 5.3 旋涡磁力搅拌器
A 5.4 分光光度计:可在540nm下测定吸光度
A 5.5 分析天平:感量0.0001g
A 6 试 剂 所有试剂溶液均需用去离子水配制。
A 6.1 柠檬酸缓冲液(0.05mol/l、pH5.3)
溶解10.5g柠檬酸(C6H8O7�6�1H2O)于800ml水中,并用1mol/L氢氧化钠调pH至5.3,(消耗约110ml 1mol/L氢氧化钠),再用水定容至1000ml。
A 6.2 底物—1%燕麦木聚糖
称取1.0g燕麦木聚糖,溶于80ml 60℃柠檬酸缓冲液中,磁力搅拌加热至沸腾,继续搅拌冷却至室温,加盖缓慢搅拌过夜。用柠檬酸缓冲液定容至100ml。此底物溶液在4℃时最多保存一周,或将底物溶液分成等份在-20℃下冰冻保存,临用前融解,搅拌均匀使用。
A 6.3 DNS试剂
溶解50.0g 3,5二硝基水杨酸于4000ml水中,不断磁力搅拌,缓缓加入80.0g氢氧化钠,使之完全溶解,在继续磁力搅拌下,将1500g酒石酸钾钠分数次少量加入,并小心加热,溶液最高温度不超过45℃。冷却至室温后定容至5000ml。如溶液不澄清,用Wheatman1号滤纸过滤,然后室温保存于深色瓶中。
A 7 样品制备
精确称取样品1.0000g,置于研钵内,加入5ml的柠檬酸缓冲液,研磨片刻,放置30min后,用柠檬酸缓冲液稀释受检样品。调整稀释倍数使测定时产生的吸光度在0.10~0.40之间。
A 8 测定步骤
A 8.1 试样测定
分别向2支试管加入1.8ml底物溶液,置50℃水浴保温5min。在其中1支试管中加入200μl稀释酶样,磁力旋转搅拌均匀,置50℃水浴中,准确保温5min。分别加入3.0ml DNS试剂至2支试管中,搅拌均匀。在另一试管(空白管)中加入200μl缓冲液。同时将2支试管置入沸水浴准确保温5min,取出置入冷水中冷却至室温。在540nm处测量酶样对空白的吸光度,在酶活标准曲线上读取酶活,再乘以酶样稀释倍数。继续做2个重复测定。
A 8.2 标准曲线的制定
A 8.2.1 配制10μmol/ml木糖储备液
将150mg木糖溶解于柠檬酸缓冲液中,并用柠檬酸缓冲液定容至100ml。储备液可分成小量在-20℃下冰冻。使用前,融解并混合均匀。
A 8.2.2 配制标准稀释液
用缓冲液稀释储备液配制以下标准稀释液:
稀释比例 木糖(μmol/ml) 酶活(BXU/ml)
1+0 10.0 33.33
1+1 5.0 16.67
1+2 3.33 11.11
1+4 2.0 6.67
A 8.2.3 制备标准曲线
每种标准稀释液做2次重复测定。分别向2支试管中加入1.8ml底物溶液,50℃水浴保温5min。加入3.0mlDNS试剂和200μl标准稀释液,在沸水浴中准确保温5min,冷却后在540nm处测量样品对试剂空白的吸光度。以200μl柠檬酸缓冲液代替标准稀释液配制试剂空白。每批样品制备一次标准曲线。
A 9 测定结果的计算

木聚糖酶活性(BXU/g) = (木糖浓度*1000*稀释倍数)/(样品重量*反应时间300S)