當前位置:首頁 » 服務存儲 » 胰蛋白酶edta存儲
擴展閱讀
webinf下怎麼引入js 2023-08-31 21:54:13
堡壘機怎麼打開web 2023-08-31 21:54:11

胰蛋白酶edta存儲

發布時間: 2022-05-30 15:01:50

1. EDTA加入胰酶消化細胞的具體作用是什麼

細胞之間是通過CAM(細胞粘性分子)相連的,而很多粘性分子只有在有+2價金屬離子,如Ca2+,Mg2+,的存在下才能行使這種功能.在胰酶中加EDTA的作用是熬合這些二價離子,使細胞被消化成單細胞形態

2. 可以用含edta的胰蛋白酶做流式和細胞凋亡嗎

看你要做的是什麼檢測。如果是細胞表面標記,盡量不要使用胰酶消化,否則可能破壞表面的分子構象,導致假陰性。這類情況可以使用彈性酶,膠原酶等來短時間消化,或者單獨使用EDTA。

3. 胰酶加EDTA怎麼終止消化如果棄液的話,消化液里的細胞不就沒了

胰酶切割細胞外基質的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,比較胰酶的活性,EDTA的作用更加溫和。有的人在胰酶里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,如果胰酶中加有EDTA,就要離心,細胞就不會浪費掉。河南省幹細胞庫為您解答,希望能解決您的疑問。

4. 含EDTA的胰酶消化液包裝上寫著4度保存,但是我不小心放-20度了,再放回4度還能用嗎,60塊一瓶呢捨不得丟

低溫不會破壞酶的活性的,沒事的。

5. 胰蛋白酶為什麼不能在鹼性溶液里保存

酶是蛋白質,鹼性條件下會水解

6. 25%胰蛋白酶和胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)的區別

EDTA是乙二胺四乙酸,一種金屬螯合劑。一般和胰蛋白酶配合使用。原因在於,鈣,鎂等金屬離子會降低胰酶活力,故在使用胰酶消化液時要配合加入EDTA。它可以螯合這些離子,消除對胰酶的抑制。

7. 求生化試劑中用於細胞培養的胰蛋白酶EDTA消化液的使用方法。

1.
貼壁細胞的消化:
a)
吸去培養液,用無菌的
PBS、Hanks
液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
b)
加入少量胰蛋白酶-EDTA
消化液,蓋過細胞即可,室溫放置
1-2
分鍾。不同的細胞消化時間有所不同,對於貼壁牢固的細胞可適當延長消化時間。
c)
顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除消化液。加入含血清的細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用於後續實驗。
d)
如果發現消化不足,可加入胰蛋白酶-EDTA
消化液重新消化。
e)
如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000-2000g
離心
1
分鍾,沉澱細胞,盡量去除胰酶細胞消化液後,加入含血清的完全培養液重新懸浮細胞,即可用於後續實驗。
2.
組織的消化:
不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為宜。
可以看看索萊寶的胰蛋白酶EDTA消化液。

8. 細胞培養用胰蛋白酶溶液如何配製與消毒

博凌科為生物科技-為你解答:胰蛋白酶溶液的配製與消毒:胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰 酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關,在pH為8.0、溫度為37℃時,胰酶溶液的作用能力最強。使用胰酶時,應把握 好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+、 Mg2+和血清、蛋白質克降低胰酶的活性,所以配製胰酶溶液時應選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks 液。終止消化時,可用含有血清培養液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。1. 稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調PH到7.2左右)或PBS(D- hanks)液中。攪拌混勻,置於4℃內過夜。2. 用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈台內用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。然後分裝成小瓶於-20℃保存以備使用。

9. 請問人巨噬細胞的消化是用胰蛋白酶+EDTA,還是只用EDTA

你好!我認為您應該搞清楚胰蛋白酶和EDTA在消化過程中的作用。
消化的目的是去除細胞之間的連接,細胞之間會有蛋白類細胞外基質存在,從而使細胞之間相互連接在一起及一些蛋白類細胞外基質具有粘附作用,從而貼壁。胰蛋白酶就是作用於賴氨酸和精氨酸羧基斷肽鍵,從而起到消化目的。
一些組織中需要Ca2+等起到維持組織完整性,而EDTA也就是乙二胺四乙酸可以與Ca2+結合,從而去除鈣離子,使細胞分散。其作用比胰蛋白酶緩和。使用濃度為0.02%,以無鈣、鎂的平衡鹽溶液配製。
實驗室內常將胰蛋白酶和EDTA聯合使用。可提高消化效率,細胞分散情況改善。
EDTA不能被血清抑制,所以消化後必須徹底清洗。EDTA對成纖維細胞作用差。
結合上面所述,你就可以進行判斷!