① Hanks液的配製方法
甲液:Na2HPO4•2H2O 0.06克 KH2PO4 0.06克 MgSO4•7H2O 0.20克葡萄糖 1.00克 NaCl 8.00克三蒸水 750毫升
乙液:CaCl2 0.14克三蒸水 100毫升
①將乙液徐徐加入甲液中。②將0.35克NaHCO3溶解在37℃ 100毫升三蒸水中。③用數滴NaHCO3液溶解0.02克酚紅。④將②、③液移入①液中。⑤用三蒸水定容至1000毫升,充分混勻,4℃冰箱過夜。⑥濾過消毒,小瓶分裝,冷藏。
注意:酚紅對細胞有一定毒性,目前實驗中的用量除0.02克外,還有0.01克和0.005克,也有BSS液中不加酚紅的。酚紅量不同,BSS顏色也不同。
② 求酚紅標准曲線
此類標准曲線沒有現成的,需要自己動手製作的。
具體舉例如下:
精密稱取酚紅50mg,用1mol/l的NaOH溶液溶解後,加pH值8.95的0.9%氯化鈉注射液至50ml ,然後逐級稀釋成濃度為10.00ug/ml、5.00ug/ml、2.50ug/ml、1.00ug/ml、0.50ug/ml的酚紅溶液,在546nm處測定吸收度,以濃度為橫坐標,吸收度為縱坐標作標准曲線,其回歸方程為:y= 0.1072x – 0.025 (R=0.9901)。
因為實驗稀釋酚紅的溶液各有不同並且實驗人員吸收波長設定不同,所以回歸方程肯定差異很大。沒有現成的可以用的,自己繪制比較可靠。
③ 有人知道酚紅在紫外可見分光光度計中的吸收光譜是怎樣的嗎
如果你們實驗室內有掃描分光光度計的話,可以自己配置溶液測試一下,我搜集了一下資料,沒有查到。
④ 0.5%酚紅溶液怎麼配置啊
說仔細
點
⑤ D-Hanks液和PBS有什麼區別
PBS:磷酸緩沖鹽溶液——具有pH緩沖作用的等滲鹽溶液。PBS溶液又稱磷酸鹽緩沖溶液,一般選擇K2HPO4和KH2PO4配製,因為鈉鹽溶解的較慢。根據不同pH的溶液,稱量不同質量的磷酸鹽,也可以用pH計調溶液的pH。PBS一般用作支持電解質。其配置方法如下:採用去離子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配製PBS溶液,按以下步驟進行:(1) 配製1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4; (2) 配製1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 將18.2%(體積分數)KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合;最終 測定PBS液的PH值約為7.4。其作用接近於生理鹽水,但是在實驗室內比生理鹽水的用途要廣泛。
Hanks:平衡鹽溶液——無機鹽和葡萄糖濃度接近大部分動植物細胞的水平,可作為動植物細胞短期培養(保存)。 Hank\'s配方:NaCl 8.01;KCl 0.4;CaCl2 0.14; NaHCO3 0.35;KH2PO 4 0.06;Glucose 0.34(g/l);
D-Hank' s:不含鈣離子、鎂離子、葡萄糖。相比較而言,hanks液中鹽成分較PBS復雜,且有葡萄糖,可為細胞提供簡單的營養,而pbs中只有磷酸根,鈉,鉀,氯離子,只是最簡單的鹽平衡緩沖液,不能為細胞提供暫時的營養 。關鍵要看你用這些液體來洗細胞還是存儲細胞了
⑥ 求:0.04%酚紅液、10%Fecl3溶液、1%胰蛋白腖水溶液的配製方法
找個實驗室待幾天後,這些基本操作一般都會了,在這里說是說不清楚的。