⑴ 液相色譜儀每針的出峰時間一針比一針晚。今天做實驗時，標品前四針出峰時間相同，後幾針就開始以0.1秒
原因分析：
1.你的流動相中有三乙胺或二乙胺等掃尾劑,應控制掃尾劑的用量,不要過量,嚴格按照標准方法配製.
2.含有掃尾劑的流動相平衡時間本身就很長,不建議每天都清洗色譜系統,可以採用在不工作的時候將廢液管接迴流動相瓶中低流量連續平衡色譜系統,減少每次工作的流動相平衡時間.
3.環境溫度的影響也較大,應當使用柱溫箱.
4.如果使用的是視差折光檢測器,不但要使用柱溫箱,連室溫也要控制,避免人員在實驗室頻繁走動導致的溫度變化.
5.你的檢測器是否有溫度控制,如果有建議與色譜柱採用相同的溫度.
⑵ 配製100ML酸乳，需在鮮牛乳中加入10%乳酸多少毫升
你沒有說出乳酸在100ML酸乳的比例，是多少；答案因此也就沒有。10%只是乳酸純度，不代表配置酸乳的純度。
⑶ 用氣相色譜能分開正己烷和正丁醇嗎
測酒精含量吧白酒份十復雜掌握其幾重要份（乙酸乙酯、丁酸乙酯、乳酸乙酯、酸乙酯等）含量指導勾酒師控制白酒品質同明白酒釀造工藝產些害物質（甲醇、雜醇油等）量使白酒產品真健康
採用DNP填充柱氫火焰離化檢測器檢測乙酸丁酯內標物定量白酒醇酯含量
測定組：乙醛、甲醇、乙酸乙酯、丙醇、仲丁醇、乙縮醛、異丁醇、丁醇、丁酸乙酯、異戊醇、戊酸乙酯、乳酸乙酯、酸乙酯
檢測條件：柱溫90℃、檢測器135℃、汽化室135℃載氣流量30ml/min採用內標定量
內標析,要求試必須存內標物,內標物與各組色譜峰能彼,並盡量接近預測組色譜峰
內標種間接或相校準析測定品某組含量加入種內標物質校誰消除於操作條件波析結產影響提高析結准確度
內標氣相色譜定量析種重要技術使用內標品加入定量標准物質色譜拄所離受試其組峰干擾要測定內標物待測組峰面積與相響應值即求待測組品百含量採用內標定量內標物選擇項十重要工作理想說內標物應能純知化合物能准確、已知量加品應析品組基本相同或盡能致物理化性質(化結構、極性、揮發度及溶劑溶解度等)、色譜行響應特徵析物質同系物色譜析條內標物必須能與品各組充離
影響內標測組峰高或峰面積比值素主要化面、色譜面儀器面三類
由化面原產面積比變化析重復品現
化面素包括：
1、內標物品混合；
2、內標物品組間發反應
3、內標物純度變等
於比較熟說色譜面問題發能性更些色譜見些問題(滲漏)絕面積影響比較面積比影響則要些絕面積變化已足使面積比發顯著變化程度定某重要色譜問題存比進量改變太品組濃度內標濃度間差別檢測器非線性等進量應足夠並保持變才致於造檢測器積裝置飽認比較靠色譜固看應著重檢查積裝置設置、斜率峰寬定位積裝置發懷疑力證據：面積比變峰高比保持相恆定
製作內標標准曲線應注意?
用內標做色定量析先配製定重量比測組內標品混合物做色譜析測量峰面積做重量比面積比關系曲線曲線即標准曲線實際品析所採用色譜條件應盡能與製作標准曲線所用條件致製作標准曲線僅要註明色譜條件(固定相、柱溫、載氣流速等)應註明進體積內標物濃度製作內標標准曲線各點並完全落直線應求面積比重量比比值與其平均位標准偏差使用程應定期進行單點校若所值與平均值偏差於2曲線仍使用若於2則應重作曲線曲線鉸短期內即產變則宜使用內標定量
歡迎追問
⑷ 高效液相色譜儀流動相為0.005mol/l的硫酸，這里的硫酸是不是只是調PH配製的時候要精確到用容量瓶定容嗎
如果待測物質裡面有弱的有機酸根（如乳酸、醋酸）等，硫酸的作用還可以將其變成游離酸進行檢測。我以前測量有機酸的時候，使用的就是有機酸柱（偶爾用C18柱），流動相也是0.005M硫酸。
配置的時候需要用容量瓶，精確定容。
如果流動相的濃度不同，對鋒面積可能會有影響。建議精確配置。
⑸ 液相色譜儀標品如何配製
請問你是配標樣做標准曲線還是干什麼用？要是做標准曲線，一般看你的樣品好不好溶，好溶的話，配個濃度高的母液。一般我是稱的時候抖一下，都出多少就多少，例如我稱時抖出2.384mg的標樣，我就加2.384ml的溶劑配成1mg/ml的母液，再稀釋成六個等距的點就可以了，一般六個等距點後還要加一個最低檢測線的點的，標准曲線的范圍拉寬一點以後檢測就不用稀釋樣品啦
⑹ 高效液相色譜如何根據出峰面積確定糖濃度
沒有內外標理論上是測不出來的，但是如果你可以收集色譜柱分離後的所有樣品，然後出去溶劑，就可以直接計算樣品的質量。如果溶劑裡面有鹽，建議使用去鹽柱(desalting column).如果不能收集樣品，也沒有海藻糖的標准樣，建議使用和海藻糖具有相同發光團的糖作為標准樣。
⑺ 飼料中乳酸含量如何測定
乳酸一般都是用液相色譜測，我測過青貯中的乳酸，但不知道飼料中的行不行，含量應該比較低吧？
⑻ 如何測定食品中的乳酸菌
菌種的分離 取lmL鹵汁以10倍遞增稀釋方法（一份酸奶，九份無菌水，再取一份第一隻管中溶液，加九份無菌水，依次類推），將其稀釋至1/10～10的-10次冪（我打不上去），然後從不同濃度稀 釋液中分別取lmL傾注在平皿中，再倒入培養基相混合，待培養基凝固後倒置於30~C恆溫下 培養48h。挑取長勢良好的單個茵落劃線分純，直至純化(茵落單個大小一致，革蘭氏染色鏡 檢，茵體一致)。結果分離得到3株不同菌株，分別編號為菌株1、菌株2、菌株3。再分別轉移 到試管斜面上進行保存。 分離用培養基：牛肉膏5g，蛋白腖10g，氯化鈉5g，蒸餾水1 000 mL，瓊脂20g，pH7．0—7．2 ；保存用斜面培養基：酵母膏1％ ，碳酸鈣2％ ，葡萄糖1％ ，瓊脂2％ ，pH 7．0。 培養條件 將分離出的菌株1、菌株2、菌株3分別接種在上述4種不同的培養基上， 在30。【=恆溫條件下培養48h後觀察並測定其培養結果。 測定方法 菌落總數採用逐級稀釋法來計數；pH值用pHS一2C酸度計測定；乳酸定性 及含量測定依據食品檢驗技術 1I．2．1乳酸菌的分離與篩選的試驗程序 自然發酵酸奶---稀釋---培養---挑起單菌落染色、鏡檢一挑 選革蘭氏陽性球菌單菌落一Ⅲ號培養基一挑選溶鈣圈大的球菌反復在Ⅲ號培養基上幾次純化篩選一單菌落優 良菌株一試管穿刺低溫保存。 1．2 1．2 乳酸菌的鑒定 用光學顯微鏡、放大鏡進行乳酸菌的形態特徵鑒定。生理生化特徵鑒定：產乳 酸定性試驗——乳酸紙層析法0- 、過氧化氫酶(接觸酶)反應�6�8、明膠水解反應 、硫化氫反應 、乳酸菌 發酵營養型試驗0 、耐鹽、酸、溫度試驗。 1．2．I．3 乳酸菌的保存�6�8 採用定期移植低溫保藏法。培養基配方：葡萄糖1％ 、蛋白腖0 2％ 、 l(}l2PQ|0．2％、瓊脂20％、pH值7 0，分裝試管，121。c滅菌30min。將使用對數生長期後期的細胞進行穿刺 培養，然後密封存於冰箱玲藏室內(5qc左右)，2個月移植1次。 1．2．2 分離乳酸菌的生理特點試驗 1 2 2．1 最適生長溫度的測定OD值以同溫下不接種培養基作對照，定期取出接種培養基在721分光光度 計上，用最大吸收光波長 =6001RIifl測定。 1．2．2．2 生長周期的測定oD值(方法同上)；pH值：PHB一4pH計；可滴定酸(以乳酸計)：吸取ImL菌液 加入9Ⅱ1L蒸餾水，加入1～2滴酚酞，用0．1NNaOH滴定。 1．2 2．3 最適pH值的測試、最適鹽濃度的測試。 供試樣品及培養基 分離用樣品：酸奶、酸奶及西紅柿均為市售 分離用培養基：①BCP培養基：酵母膏2 5g，蛋白腖5g，葡萄糖5g，溴甲酚紫0 04g，瓊脂15g， 蒸槽水lO00ml，pH7 0；②MRS培養基見文獻 。 菌種保藏用培養基：脫脂乳培養基：新鮮牛乳離心去掉上層乳脂，下層奶液分裝試管，105℃ 滅菌20mln。 菌利 鑒定用培養基見文獻 6。 1 2 方法 1 2 1 乳酸菌的分離純化 取泡菜汁、酸奶、西紅柿表面洗液進行梯度稀釋，分別用傾注法、塗布 法和劃線法在BCP和MRS培養基平板上進行菌種分離。挑取在BCP平板上有透明目的菌落，在 MRS平扳上有溶鈣圈的菌落，反復純化至純種，挑菌至脫脂牛奶試管中保存 1．2 2 乳酸菌復篩對初篩菌株進行革蘭氏染色，保留革蘭氏陽性菌株．並對其所產乳酸能力進 行定性、定量分析，篩選出產酸高的菌株保存，再把產酸高的菌株經蘿l、汁發酵 】，進一步選擇產 酸高、_l】味純正的菌株保存鑒定 1 2 3 乳酸定性測定果用紙層析法。溶劑系統為乙醇：濃氨水：水=80：5：15，顯色劑為0 04％ 的溴甲酚紫酒精溶液。層析時將乳酸、檸檬酸配成1％ 的標准溶液，兩種標准溶液 及乳酸發酵液 均點樣3 ．上行層析，顯色與標准樣比較 1．2 4 乳酸的定量測定採用氣相色譜法，利用苄酯化法制備乳酸衍生物，將待測乳酸菌株在產 酸培養基內37"C培養3d，離心。取上清液剃備衍生物，氣相色譜分析含量。氣相色譜工作條件為： EGS色譜柱，柱溫160'C，氣化溫度180'17．，檢測器溫度l70"C，載氣為N，。 1．2 5 菌種鑒定根據《簡明第八版伯傑細菌鑒定手冊》 和《一般細菌常用鑒定手冊》[6 對復篩 出的菌株的形態、生理生化、碳源利用等方面進行系統鑒定，並提取乳酸菌株DNA，採用熔鏈溫度 .
⑼ 液相色譜中混標應當如何跑定了標品的方法時，如果樣品中有小雜峰與特徵峰沒有分開怎麼辦
你先弄少量的每種標樣，每針在此流動相下走，定性分析一下其保留時間，以確定將來出峰那個峰是那種物質。雜峰分不開可以換個長柱子，你用的是150的還是250的？或者調整流動相比例將其拽開。
⑽ 乳酸怎麼在液相色譜中出峰
如果液相色譜用的是紫外檢測的話就出不了，必須有共軛結構才有紫外吸收。可以考慮用氣相色譜或者氣質聯用。