1. 伊紅美蘭的配製的具體步驟
瑞氏染液配製:
(1) 瑞氏染液配製:
瑞氏染料 830gm或1g
甲醇(AR) 500ml或600ml
○先稱乾燥(事先放入溫箱乾燥過夜)瑞氏染料放置乳缽內,用乳棒輕輕敲碎染料成粉末,再行研磨至聽不到研芝麻聲即呈細粉末,加少許甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸內顯「一面鏡」光澤,而無染料粉粒沉著。
○再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮,靜置片刻,將上層液體倒入一清潔儲存瓶內(最好用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重復數次,至乳缽內染料及甲醇用完為止,搖勻,密封瓶口。
○存室溫暗處,儲存愈久,則染料溶解、分解就越好,一般儲存3個月以上為佳。
(2) 緩沖液:
●緩沖液作用:
○染色對氫離子濃度是十分敏感的,據觀察pH值的改變,可使蛋白質與染料形成的化合物重新離解。
○緩沖液須保持一定的pH使染色穩定,PBS的pH 一般在***~6.8,
○偏鹼性染料可與緩沖液中酸基起中和作用,偏酸性染料則與緩沖液中的鹼基起中和作用,使pH恆定。
●緩沖液配製(pH6.4~6.8,弱酸性):
配方1 : 配方2:
1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml
1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml
H2O(新鮮) 加至1000ml
置室溫黑暗處,瓶口密封,防止黴菌污染,如有污染則應報廢。
2. 2%伊紅Y溶液怎麼配置
回答前先說兩點:
1、GBT4789.28-2003里的EMB是用來做大腸菌群的,但是食品大腸菌群已經有新標准,不再用2003版本的了,也不再使用EMB,只在做水的時候用。
2、最好購買成品培養基,這些成分復雜的培養基配起來太費力了,一瓶大概80元左右,250g,可以用很久了。
伊紅和美藍在水中不是很好溶解,但是比較容易溶解於有機溶劑中,可以先用少量酒精溶解,然後再用純水定溶到刻度線,稱2克定容到100ml這些我就不用細說了吧?
乳糖可以在調整完ph值後直接加入,然後再滅菌,不需要臨用時候加(這個在GB/T5750的標准里已經是這樣寫的了),伊紅和美藍其實也可以加進去之後再滅菌的,影響不大,成品培養基里其實就是加好了的,滅菌過程對伊紅和美藍的影響其實可以忽略。不過,你一定要按國標嚴格操作的話,伊紅美藍是可以不滅菌的,因為伊紅美藍本身就是染料,對細菌有殺滅作用,不過你使用的量器和吸管應該用無菌的。
3. 伊紅美藍培養基的配置方法
1.培養基成分
乳糖 1g胰蛋白腖 0.5g NaCl 0.5g K2HPO4 2g2%伊紅溶液 2ml0.5%美藍溶液 1ml瓊脂 1.5~2g蒸餾水 100ml自然pH或pH 7.2
2.配製方法
(1)稱量 稱取培養基各成分所需量。
(2)溶化 在燒杯中加入約2/3所需水量,依次逐一溶化培養基各成分。
(3)定容。
(4)調pH。
(5)按每100ml培養基加入2ml 2%伊紅溶液和1ml 0.5%美藍溶液。
(6)加瓊脂 加熱融化並補足失水。
(7)分裝、加塞、包紮。
(8)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
4. 2%伊紅水溶液怎麼配
如果配製100毫升伊紅溶液,只要將2克伊紅溶解在100毫升95%的酒精中即可。
5. 醇溶性伊紅Y能配水溶性的伊紅嗎
您好!
伊紅本來就是溶於乙醇的啊,配製的時候只是加一點,所以無所謂水溶或是醇溶。
6. 0.25%的伊紅乙醇溶液怎麼配置
0.25g的伊紅溶解在100ml的95%的乙醇中即可
7. 伊紅的醇溶性伊紅
性狀:紅色結晶狀粉末,能溶於鹼,微溶於乙醇,不溶於水。
用途:吸附指示劑,檢測F離子,定量分析滴定溴離子和碘離子。 別名 四溴熒光素;伊紅Y(醇溶);溶劑紅45;曙紅(醇溶);醇溶伊紅 英文名 Eosin Y,alcohol soluble 分子式 C20H8Br4O5 分子量 647.90 使用
伊紅Y是一種化學合成的酸性染料,在水中離解成帶負電荷的陰離子,與蛋白質的氨基正電荷的陽離子結合使胞漿染色,細胞漿、紅細胞、肌肉、結締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,與藍色的細胞核形成鮮明對比。伊紅是細胞漿的良好染料。一般與蘇木素或者美蘭等其他染料配套使用。
配製
伊紅的配方很多。先列幾種如下:
(1)伊紅(水溶性)
配方:
伊紅 (水溶性) 2.5-5 g
蒸餾水 500 ml
將水溶性伊紅溶於蒸餾水中,然後加濃鹽酸10毫升,充分攪拌,靜置過夜後過濾。過濾後的沉澱用蒸餾水沖洗二次,再過濾;將沉澱物連同濾紙一起放入溫箱內乾燥,加95%酒精1000毫升,配成飽和液。使用前再用95%的酒精 1:1~2倍稀釋,加入1~2%冰醋酸。
此方法具有染色時間快,顏色鮮艷,不容易褪色,使用壽命長等特點。
(2)伊紅(醇溶性)
配方:
伊紅 (醇溶性) 2.5-5g
75%酒精 1000 ml
加幾滴冰醋酸至半透明狀。
最簡單配方---1---2%伊紅
伊紅 (水溶性)5---10g
蒸餾水 500 ml
加入1~2%冰醋酸,10滴。