A. 培養基怎麼配置
（1）配製母液。把培養基m的必需元素按原配方量的50倍/100倍或1000倍稱量後製成一種濃溶液，這種濃溶液叫母液在配製培養基時按比例分別量取母液稀釋到所需的濃度即可母液配好後貼上標簽，放在0～4℃的冰箱中可使用半年到1年，這樣傲可節省許多時間可能產生化學反應的或溶解後產生沉澱的不能放在同一個容器m配製母液要用重蒸餾水葯物要使用分析純或等級較高的化學純葯物的稱量和葯液的定容都要准確。
母液①：硫酸鎂18.5克．硝酸銨82.5克．硝酸鉀95.0克；加水定容到1000毫升，濃度為培養基的50倍，配1升培養基時量取20毫升母液
母液②：氯化鈣22.0克加水定容到500毫升，濃度為培養基的100倍，配1升培養基時量取10毫升母液
母液③：磷酸二氫鉀8.5克加水定容到500毫升，濃度為培養基的100倍，配1升培養基時量取10毫升母液。
母液④；乙二胺四乙酸二鈉3.73克硫酸亞鐵2.78克，加水定容到1000毫升，濃度為培養基的100倍，配1升培養基時量取10毫升母液
母液⑤：硼酸620毫克，硫酸錳2230毫克，硫酸鋅860毫克，硫酸銅2.5毫克，碘化鉀83毫克，鉬酸鈉25毫克，氯化鈷2.5毫克，加水定容到1000毫升，濃度為培養基的100信，配1升培養基時量取10毫升母液。
母液⑥：肌醇5克，甘氨酸100毫克，煙酸25毫克，鹽酸吡哆醇25毫克，鹽酸硫胺素5毫克，加水定容到500毫升，濃度為培養基的100倍，配1升培養基時量取10毫升母液
（2）配製培養基。配製每1000毫升培養基．稱取6～10克瓊：脂作凝固劑，具體按配方要求稱量，放在水浴鍋上慢慢溶解，先在量筒內放入一定量的水，按照母液順序和規定量，量取母液，當母液加完後，根據需要每升培養基再加入生長調節物質如吲哚乙酸或萘乙酸等，細胞分裂素類0.04～10毫克，細胞分裂素應用最多的是6-苄基腺嘌呤，加完後倒入已熔化的瓊脂中，每1000毫升培養基加入蔗糖30克或根據要求確定，定容到所需的體積，繼續加溫，直到瓊脂完全熔解，用鹽酸或氫氧化鈉對培養基的pH進行調節，多數培養基的pH在5．4～6.0，MS培養基的pH為5.7。
將配好的培養基趁熱倒入培養容器中，培養基占容器體積的1／4～1／3不要將培養基沾到容器壁上，否則容易被雜菌感染，然後及時加蓋，進行高壓滅菌，滅菌時要按高壓滅菌鍋的操作規程使用．在121℃、壓力111千帕下維持15～20分鍾，溫度和時間都要嚴格控制，到時間後立即切斷電源，當高壓鍋內壓力降到常壓後，開啟放氣閥，打開鍋蓋，取出滅菌好的培養基，放在接種室中培養3天，沒被感染後才能用來組織培養
B. 做組織培養的培養基怎麼做
你培養的是什麼細胞？普通用DMEM+5-10%胎牛血清就可以了
C. 現在需要1.2mg/L的激素KT用於組織培養，我想配50ml,怎麼配置呢然後配置1L的培養基時吸取多少呢
你的意思是在培養基中的最終濃度是1.2mg/L吧？如果是的話就這樣配置：先配置1.2mg/ml的KT母液，這是最終濃度的1000倍，要配50ml就是稱取KT粉末=1.2mg/ml乘以50ml=60mg=0.06gKT粉末，先用1~3ml鹼溶液（1mol/L的氫氧化鉀或氫氧化鈉，KT可不能直接溶於水喲）將稱好的KT粉末完全溶解後，再用水定容至50ml，配製培養基時1L培養基取1ml KT母液即可。
母液平時不用的時候要保存於4℃
D. 急！植物組織培養的母液計算。
對於2000ml的培養基應該是這樣配製的：
所謂1/2MS，指的是大量元素母液，正常的我們應該加入2000除以20即100ml的體積，因為是1/2MS，所以只需要加入50ml；微量元素母液加入：2000/100=20ml；鐵鹽母液2000/100=20ml;有機物母液2000/100=20ml；6BA加入4ml，就是4mg，NAA是0.2ml.蔗糖就是2000乘以3.0 %就是60g,瓊脂為2000乘以0.8 %就是16g
E. 培養基母液配製的方法如何
配製培養基是花卉組織培養的首要環節。培養基的成分隨著花卉的種類、不同的外植體、不同的培養階段應當有所不同。一般來說，各種培養基都有大量元素、微量元素、維生素、激素、糖和瓊脂等物質，有時還要在培養基里添加有機附加物，如活性炭、香蕉汁、椰子汁等。在生產上，首先選用已有的培養基配方，它是前人研究的成果，又是經過生產實踐驗證的。現在幾乎各種花卉用的營養基配方都有，可以免去您再研究的麻煩，當然在生產實踐中，也可適當改進。如果您找不到合適的配方，可先試用MS培養基，MS是Murashige和Skoog的縮寫，他們二人於1962年研究出來了這種培養基。下面以MS培養基為例，介紹怎樣配製。
（1）配製母液。把培養基中的必需元素按原配方量的50倍、100倍或1000倍稱量後製成一種濃溶液，這種濃溶液叫母液。在配製培養基時按比例分別量取母液稀釋到所需的濃度即可。母液配好後貼上標簽，放在0～4℃的冰箱中，可使用半年到1年，這樣做可節省許多時間。可能產生化學反應的或溶解後產生沉澱的，不能放在同一個容器中。配製母液要用重蒸餾水。葯物要使用分析純或等級較高的化學純。葯物的稱量和葯液的定容都要准確。
母液①：硫酸鎂18.5克，硝酸銨82.5克，硝酸鉀95.0克。加水定容到1000毫升，濃度為培養基的50倍，配1升培養基時量取20毫升母液。
母液②：氯化鈣22.0克。加水定容到500毫升，濃度為培養基的100倍，配1升培養基時量取10毫升母液。
母液③：磷酸二氫鉀8.5克。加水定容到500毫升，濃度為培養基的100倍，配1升培養基時量取10毫升母液。
母液④：乙二胺四乙酸二鈉3.73克，硫酸亞鐵2.78克。加水定容到1000毫升，濃度為培養基的100倍，配1升培養基時量取10毫升母液。
母液⑤：硼酸620毫克，硫酸錳2230毫克，硫酸鋅860毫克，硫酸銅2.5毫克，碘化鉀83毫克，鉬酸鈉25毫克，氯化鈷2.5毫克。加水定容到1000毫升，濃度為培養基的100倍，配1升培養基時量取10毫升母液。
母液⑥：肌醇5克，甘氨酸100毫克，煙酸25毫克，鹽酸吡哆醇25毫克，鹽酸硫胺素5毫克。加水定容到500毫升，濃度為培養基的100倍，配1升培養基時量取10毫升母液。
（2）配製培養基。配製每1000毫升培養基，稱取6～10克瓊脂作凝固劑，具體按配方要求稱量，放在水浴鍋上慢慢溶解。先在量筒內放入一定量的水，按照母液順序和規定量，量取母液。當母液加完後，根據需要每升培養基再加入生長調節物質如吲哚乙酸或萘乙酸等，細胞分裂素類0.04～10毫克，細胞分裂素應用最多的是6-苄基腺嘌呤，加完後倒入已熔化的瓊脂中。每1000毫升培養基加入蔗糖30克或根據要求確定，定容到所需的體積。繼續加溫，直到瓊脂完全熔解。用鹽酸或氫氧化鈉對培養基的pH進行調節，多數培養基的pH在5.4～6.0之間，MS培養基的pH為5.7。
將配好的培養基趁熱倒入培養容器中，培養基占容器體積的1/3～1/4。不要將培養基沾到容器壁上，否則容易被雜菌感染。然後及時加蓋，進行高壓滅菌，滅菌時要按高壓滅菌鍋的操作規程使用。在121℃、壓力111千帕下維持15～20分鍾，溫度和時間都要嚴格控制。到時間後立即切斷電源，當高壓鍋內壓力降到常壓後，開啟放氣閥，打開鍋蓋，取出滅菌好的培養基，放在接種室中培養3天，沒被感染後才能用來組織培養。
F. 母液的配置
母液和儲存液差不多，都是高濃度的培養液。在使用的時候按照比例稀釋就能使用了。這樣做的好處是使用方便，防止反復凍融對成份產生不良影響。
比如我們要配製LB培養液，如果這次需要配100ml，我們要把幾種成份一個一個稱量好，定容至100ml。明天又要用100mlLB，我們還要稱量好幾次。這樣很麻煩。不如我們這樣做：配製一瓶100倍濃度的LB母液，用100ml的時候，就取1ml母液，定容到100ml。這個100ml直接能用來培養的就是工作液。母液平時保存在低溫下，因為濃度高所以不怎麼佔地方。所以又叫儲存液。
LB只是舉個例子，事實上我們實驗室很少把LB作為母液儲存的。
G. 植物組織培養方法的配製方法
母液Ⅲ的是：將稱好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450 mL蒸餾水中，邊加熱邊不斷攪拌使它們溶解，然後將兩種溶液混合，並將pH調至5.5，最後定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。
各種母液配完後，分別用玻璃瓶貯存，並且貼上標簽，註明母液號、配製倍數、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。
MS培養基中還需要加入2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、萘乙酸（NAA）、6-苄基嘌呤（6BA）等植物生長調節物質，並且分別配成母液（0.1 mg/mL）。其配製方法是：分別稱取這3種物質各10 mg，將2，4-D和NAA用少量（1 mL）無水乙醇預溶，將6BA用少量（1 mL）的物質的量濃度為0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解過程需要水浴加熱，最後分別定容至100 mL，即得質量濃度為0.1 mg/mL的母液。
配製培養液 用量筒或移液管從各種母液中分別取出所需的用量：母液Ⅰ為50 mL，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2，4-D 5 mL、NAA 1 mL，與各種母液一起放入燒杯中。
配製培養液時應注意：①在使用提前配製的母液時，應在量取各種母液之前，輕輕搖動盛放母液的瓶子，如果發現瓶中有沉澱、懸浮物或被微生物污染，應立即淘汰這種母液，重新進行配製；②用量筒或移液管量取培養基母液之前，必須用所量取的母液將量筒或移液管潤洗2次；③量取母液時，最好將各種母液按將要量取的順序寫在紙上，量取1種，劃掉1種，以免出錯。
溶化瓊脂 用粗天平分別稱取瓊脂9 g、蒸糖30 g，放入1 000 mL的搪瓷量杯中，再加入蒸餾水750 mL，用電爐加熱，邊加熱邊用玻璃棒攪拌，直到液體呈半透明狀。然後再將配好的混合培養液加入到煮沸的瓊脂中，最後加蒸餾水定容至1 000 mL，攪拌均勻。
調pH 用滴管吸取物質的量濃度為1 mol/L的NaOH溶液，逐滴滴入溶化的培養基中，邊滴邊攪拌，並隨時用精密的pH試紙（5.4～7.0）測培養基的pH，一直到培養基的pH為5.8為止（培養基的pH必須嚴格控制在5.8）。
2 BA為細胞分裂素 NAA 是萘乙酸，為生長素的一種
3 適於百合根的激素暫時沒找到
以下是葉片和胚的激素：對麝香百合 (LiliumlongiflorumThunb)葉片進行離體培養 ,可成功獲得無菌苗。試驗結果表明 :培養基MS +BA 0 1mg/L +NAA 1 0mg/L適於初代培養 ,有助於根和芽的分化 ;MS +BA 0 5mg/L +NAA1 5mg/L適於增殖培養 ,利於愈傷組織的產生 ,並促進芽的分化 ;生根培養基為 1/ 2MS +NAA 1 0mg/L +多效唑 10 0mg/L ;當試管苗根長 1cm時移栽易成活
在含有1 mg/ L IAA,1 m g/ L GA3,6 0 0 m g/ L CH的 MS培養基上培養 ,蔗糖含量為 6 %～ 8%時 ,百合幼胚胚性生長最好 ,培養 30 d後可以得到正常胚 .在含有 0 .1 m g/ L NAA,1 m g/ L BA的 MS培養基上可以形成淡綠色的愈傷組織 ,將這些愈傷組織轉移到 1 / 2 MS無激素的培養基上培養可以形成大量的不定芽 ,不定芽生根移栽後 ,其成活率可達90 %以上
H. 組織培養的步驟
配製培養基有兩種方法可以選擇，一是購買培養基中所有化學葯品，按照需要自己配製；二是購買商品的混合好的培養基基本成分粉劑，如MS、B5等。
自己配製可以節約費用，但浪費時間、人力、且有時由於葯品的質量問題，給實驗帶來麻煩。就目前國內的情況看，大部分還是自己配製。為了方便起見，現以MS培養基為例介紹配置培養基的主要過程。
1．配製幾種母液
1．配製MS大量元素母液
一般將大量元素分別配製成100倍的母液，使用時再分別稀釋100倍。
分別稱取
NH4NO3 165g KH2PO4 17g
KNO3 190g CaCl2·2H2O 44g
MgSO4·7H2O 37g
各自配成1L的母液。倒入1L試劑瓶中，存放於冰箱中。
2．配製MS微量元素母液
一般將微量元素配製成100倍母液。
依次稱取
KI 0.083g Na2MoO4·2H2O 0.025g
H3BO3 0.62g CuSO4·5H2O 0.0025g
MnSO4·H2O 1.69g CoCl2·6H2O 0.0025g
ZnSO4·7H2O 0.86g
配成1L母液，倒入1L試劑瓶中，存放於冰箱中。
CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O 由於稱取量很小，如果天平精確度沒有達到萬分之一，可先配成調整液。
分別稱取
CuSO4·5H2O 0.05g CoCl2·6H2O 0.05g
各自配成100ml的調整液，然後取5ml就還有0.0025g的量。
3．配製MS有機母液
一般配製成100倍MS有機母液。
依次稱取
肌醇 10g 鹽酸硫胺素（VB1） 0.01g
煙酸 0.05g 甘氨酸 0.2g
鹽酸吡哆醇（VB6） 0.05g
配成1L母液，倒入1L試劑瓶中，存放於冰箱中。
4．配製MS鐵鹽母液
一般配製成100倍MS鐵鹽母液。
依次稱取
EDTA二鈉3.73g FeSO4·7H2O2.78g
配成1L母液，倒入1L試劑瓶中，存放於冰箱中。
所以MS母液有5種大量元素母液，加上MS微量元素母液、MS有機母液和MS鐵鹽母液，共8種母液。
激素母液的配製
各種生長素和細胞分裂素要單獨配製，不能混合在一起，生長素類一般要先用少量95%的酒精或1當量的NaOH溶解，細胞分裂素一般要先用1當量的鹽酸溶解，然後再加蒸餾水定容。一般取100mg配成100ml母液。
2．配製培養基
以配置1L MS培養基為例，按順序進行如下操作：
1．先在燒杯中放入一些蒸餾水。
2．分別取上面八種母液10ml倒入。
3．一般稱取30g蔗糖倒入，攪拌溶解。
4．加蒸餾水用量筒定溶至1L。
5．按設計好的方案添加各種激素，由於激素的用量很小，而且激素對組培植物的生長至關重要。所以有條件的話最好用微量可調移液器吸取，減少誤差。
6．用精密試紙或酸度計調整PH至5.7～5.8。（有條件的話使用酸度計，比較精確） 可配1當量的HCL和1當量的NaOH用來調溶液PH值。
1當量HCL配製：用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。
1當量NaOH配製：稱取NaOH 4g 配成100ml溶液。
7．稱取5g左右瓊脂粉（質量好的瓊脂粉),倒入上面配好的溶液中，放在電爐上加熱至沸騰，直到瓊脂粉熔化。
8．稍微冷卻後，分裝入培養容器中。無蓋的培養容器要用封口膜或牛皮紙封口，用橡皮筋或繩子扎緊。
9．放入消毒滅菌鍋滅菌，滅菌20分鍾左右。
10．滅菌後從滅菌鍋中取出培養基，平放在實驗台上令其冷卻凝固。 滅菌是組織培養重要的工作之一。初學者要清楚有菌和無菌的范疇。有菌的范疇是：凡是暴露在空氣中的物體，接觸自然水源的物體，至少它的表面都是有菌的。依此觀點，無菌室等未處理的地方、超凈台的表面、簡單煮沸的培養基、我們使用的刀、剪在未處理之前、我們身體的整個外表及與外界相連的內表，如整個消化道、呼吸道，即我們呼出的氣體、培養容器無論洗得多干凈等等都是有菌的。
這里所指的菌，包括細菌、真菌、放線菌、藻類及其他微生物。菌的特點是：極小，肉眼看不見。無處不在，無時不有，無孔不入。在自然條件下忍耐力強，生活條件要求簡單，繁殖力極強，條件適宜時便可大量滋生。
無菌的范疇是：經高溫灼燒或一定時間蒸煮過後的物體，經其他物理或化學的滅菌方法處理後的物體（當然這些方法必須已經證明是有效的），高層大氣、岩石內部、健康的動、植物的不與外部接觸的組織內部，強酸強鹼，化學元素滅菌劑等表面和內部都是無菌的。從以上可以看出：在地球表面無菌世界要比有菌世界小的多。
滅菌是指用物理或化學的方法，殺死物體表面和孔隙內的一切微生物或生物體，即把所有生命的物質全部殺死。與此相關的一個概念是消毒，它指殺死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再發生危害作用，顯然經過消毒，許多細菌芽孢、黴菌厚垣孢子等不會完全殺死，即由於在消毒後的環境里和物品上還有活著的微生物，所以通過嚴格滅菌的操作空間（接種、超凈台等）和使用的器皿，以及操作者的衣著和手都不帶任何活著的微生物。在這樣的條件下進行的操作，就叫做無菌操作。
植物組織培養對無菌條件的要求是非常嚴格的，甚至超過微生物的培養要求，這是因為培養基含有豐富的營養，稍不小心就引起雜菌污染。要達到徹底滅菌的目的，必須根據不同的對象採取不同的切實有效的方法滅菌，才能保證培養時不受雜菌的影響，使試管苗能正常生長。
常用的滅菌方法可分為物理的和化學的兩類，即：物理方法如乾熱（烘燒和灼燒）、濕熱（常壓或高壓蒸煮）、射線處理（紫外線、超聲波、微波）、過濾、清洗和大量無菌水沖洗等措施；化學方法是使用升汞、甲醛、過氧化氫、高錳酸鉀、來蘇水、漂白粉、次氯酸鈉、抗菌素、酒精化學葯品處理。這些方法和葯劑要根據工作中的不同材料不同目的適當選用。
1．培養基用濕熱滅菌
培養基在制備後的24小時內完成滅菌工序。高壓滅菌的原理是：在密閉的蒸鍋內，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高，從而鍋內溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內溫度達121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。
注意完全排除鍋內空氣，使鍋內全部是水蒸氣，滅菌才能徹底。高壓滅菌放氣有幾種不同的做法，但目的都是要排凈空氣，使鍋內均勻升溫，保證滅菌徹底。常用方法是：關閉放氣閥，通電後，待壓力上升到0.05MPa時，打開放氣閥，放出空氣，待壓力表指針歸零後，再關閉放氣閥。
關閥再通電後，壓力表上升達到0.1MPa時，開始計時，維持壓力0.1～0.15MPa，20分鍾。
按容器大小不同，保壓時間有所不同，見表。該表所列數字是徹底滅菌很保險的數字，如果容器體積較大，但是放置的數量很少，也可以減少時間。 接種時由於有一個敞口的過程，所以是極易引起污染的時期，這一時期主要由空氣中的細菌和工作人員本身引起，接種室要嚴格進行空間消毒。接種室內保持定期用1%～3%的高錳酸鉀溶液對設備、牆壁、地板等進行搽洗。除了使用前用紫外線和甲醛滅菌外，還可在使用期間用70%的酒精或3%的來蘇兒噴霧，使空氣中灰塵顆粒沉降下來。無菌操作可按以下步驟進行：
1．在接種4小時前用甲醛熏蒸接種室，並打開其內紫外線燈進行殺菌；
2．在接種前20分鍾，打開超凈工作台的風機以及台上的紫外線燈；
3．接種員先洗凈雙手，在緩沖間換好專用實驗服，並換穿拖鞋等；
4．上工作台後，用酒精棉球搽拭雙手，特別是指甲處。然後搽拭工作檯面；
5．先用酒精棉球搽拭接種工具，再將鑷子和剪刀從頭至尾過火一遍，然後反復過火尖端處，對培養皿要過火烤乾；
6．接種時，接種員雙手不能離開工作台，不能說話、走動和咳嗽等；
7．接種完畢後要清理干凈工作台，可用紫外線燈滅菌30分鍾，若連續接種，每5天要大強度滅菌一次。
接種是將已消毒好的根、莖、葉等離體器官，經切割或剪裁成小段或小塊，放入培養基的過程。現將接種前後的程序連貫地介紹。
無菌接種步驟：
1．將初步洗滌及切割的材料放入燒杯，帶入超凈台上，用消毒劑滅菌，再用無菌水沖洗，最後瀝去水分，取出放置在滅過菌的紗布上或濾紙上。
2．材料吸干後，一手拿鑷子、一手拿剪刀或解剖刀，對材料進行適當的切割。如葉片切成0.5cm平方的小塊；莖切成含有一個節的小段。微莖尖要剝成只含1～2片幼葉的莖尖大小等。在接種過程中要經常灼燒接種器械，防止交叉污染。
3．用灼燒消毒過的器械將切割好的外植體插植或放置到培養基上。具體操作過程（以試管為例）是：先解開包口紙，將試管幾乎水平拿著，使試管口靠近酒精燈火焰，並將管口在火焰上方轉動，使管口裡外灼燒數秒鍾。若用棉塞蓋口，可先在管口外面灼燒，去掉棉塞，再燒管口裡面。然後用鑷子夾取一塊切好的外植體送入試管內，輕輕插入培養基上。若是葉片直接附在培養基上，以放1～3塊為宜。至於材料放置方法除莖尖、莖段要正放（尖端向上）外，其他尚無統一要求。接種完後，將管口在火焰上再灼燒數秒種。並用棉塞，塞好後，包上包口紙，包口紙裡面也要過火。 培養指把培養材料放在培養室（無光、適宜溫度、無菌）里，使之生長，分裂和分化形成愈傷組織，光照條件下進一步分化成再生植株的過程。
1．培養方法
1．固體培養法
即用瓊脂固化培養基來培養植物材料的方法。是現在最常用的方法。雖然該方法設備簡單，易行，但養分分布不均，生長速度不均衡，並常有褐化中毒現象發生。
2．液體培養法
即用不加固化劑的液體培養基培養植物材料的方法。由於液體中氧氣含量較少，所以通常需要通過攪動或振動培養液的方法以確保氧氣的供給，採用往復式搖床或旋轉式搖床進行培養，其速度一般為50～100r/min，這種定期浸沒的方法，既能使培養基均一，又能保證氧氣的供給。
2．培養步驟
1．初代培養
初代培養旨在獲得無菌材料和無性繁殖系。即接種某些外植體後，最初的幾代培養。初代培養時，常用誘導或分化培養基，即培養基中含有較多的細胞分裂素和少量的生長素。初代培養建立的無性繁殖系包括：莖梢、芽叢、胚狀體和原球莖等。根據初代培養時發育的方向可分為：
1）頂芽和腋芽的發育
採用外源的細胞分裂素，可促進使具有頂芽或沒有腋芽的休眠側芽啟動生長，從而形成一個微型的多枝多芽的小灌木叢狀的結構。在幾個月內可以將這種叢生苗的一個枝條轉接繼代，重復芽苗增殖的培養，並且迅速獲得多數的嫩莖。然後將一部分嫩莖轉移到生根培養基上，就能得到可種植到土壤中去的完整小植株。一些木本植物和少數草本植物也可以通過這種方式來進行再生繁殖，如月季、茶花、菊花、香石竹等等。這種繁殖方式也稱作微型繁殖，它不經過發生愈傷組織而再生，所以是最能使無性系後代保持原品種的一種繁殖方式。
適宜這種再生繁殖的植物，在采樣時，只能採用頂芽、側芽或帶有芽的莖切段，其他如種子萌發後取枝條也可以。
莖尖培養可看作是這方面較為特殊的一種方式。它採用極其幼嫩的頂芽的莖尖分生組織作為外植體進行接種。在實際操作中，採用包括莖尖分生組織在內的一些組織來培養，這樣便保證了操作方便以及容易成活。
用靠培養定芽得到的培養物一般是莖節較長，有直立向上的莖梢，擴繁時主要用切割莖段法，如香石竹、矮牽牛、菊花等。但特殊情況下也會生出不定芽，形成芽叢。
2）不定芽的發育
在培養中由外植體產生不定芽，通常首先要經脫分化過程，形成愈傷組織的細胞。然後，經再分化，即由這些分生組織形成器官原基，它在構成器官的縱軸上表現出單向的極性（這與胚狀體不同）。多數情況下它形成芽，後形成根。
另一種方式是從器官中直接產生不定芽，有些植物具有從各個器官上長出不定芽的能力如矮牽牛、福祿考、懸鉤子等。當在試管培養的條件下，培養基中提供了營養，特別是提供了連續不斷植物激素的供應，使植物形成不定芽的能力被大大地激發起來。許多種類的外植體表面幾乎全部為不定芽所覆蓋。在許多常規方法中不能無性繁殖的種類，在試管條件下卻能較容易地產生不定芽而再生，如柏科，松科，銀杏等一些植物。許多單子葉植物儲藏器官能強烈地發生不定芽，用百合鱗片的切塊就可大量形成不定鱗莖。
在不定芽培養時，也常用誘導或分化培養基。用靠培養不定芽得到的培養物，一般採用芽叢進行繁殖，如非洲菊、草莓等。
3）體細胞胚狀體的發生與發育
體細胞胚狀體類似於合子胚但又有所不同，它也通過球形，心形，魚雷形和子葉形的胚胎發育時期，最終發育成小苗。但它是由體細胞發生的。胚狀體可以從愈傷組織表面產生，也可從外植體表面已分化的細胞中產生，或從懸浮培養的細胞中產生。
4）初代培養外植體的褐變
外植體褐變是指在接種後，其表面開始褐變，有時甚至會使整個培養基褐變的現象。它的出現是由於植物組織中的多酚氧化酶被激活，而使細胞的代謝發生變化所致。在褐變過程中，會產生醌類物質，它們多呈棕褐色，當擴散到培養基後，就會抑制其他酶的活性，從而影響所接觸外植體的培養。
褐變的主要原因如下：
a、植物品種 研究表明，在不同品種間的褐變現象是不同的。由於多酚氧化酶活性上的差異，因此，有些花卉品種的外植體在接種後較容易褐變，而有些花卉品種的外植體在接種後不容易褐變。因此，在培養過程中應該有所選擇，對不同的品種分別進行處理。
b、生理狀態由於外植體的生理狀態不同，所以在接種後褐變程度也有所不同。一般說來，處於幼齡期的植物材料褐變程度較淺，而從已經成年的植株採收的外植體，由於含醌類物質較多，因此褐變較為嚴重。一般來說，幼嫩的組織在接種後褐變程度並不明顯，而老熟的組織在接種後褐變程度較為嚴重。
c、培養基成分 濃度過高的無機鹽會使某些觀賞植物的褐變程度增加，此外，細胞分裂素的水平過高也會刺激某些外植體的多酚氧化酶的活性，從而使褐變現象加深。
d、培養條件不當 如果光照過強、溫度過高、培養時間過長等，均可使多酚氧化酶的活性提高，從而加速被培養的外植體的褐變程度。
為了提高組織培養的成苗率，必須對外植體的褐變現象加以控制。可以採用以下措施防止、減輕褐變現象的發生。
1．選擇合適的外植體 一般來說，最好選擇生長處於旺盛的外植體，這樣可以使褐變現象明顯減輕。
2．合適的培養條件 無機鹽成分、植物生長物質水平、適宜溫度、及時繼代培養均可以減輕材料的褐變現象。
3．使用抗氧化劑 在培養基中，使用半胱氨酸、抗壞血酸等抗氧化劑能夠較為有效地避免或減輕很多外植體的褐變現象。另外，使用0.1%～0.5%的活性炭對防止褐變也有較為明顯的效果。
4．連續轉移 對容易褐變的材料可間隔2～24小時的培養後，再轉移到新的培養基上，這樣經過連續處理7～10天後，褐變現象便會得到控制或大為減輕。
(2)繼代培養
在初代培養的基礎上所獲得的芽、苗、胚狀體和原球莖等，數量都還不夠，它們需要進一步增殖，使之越來越多，從而發揮快速繁殖的優勢。
繼代培養是繼初代培養之後的連續數代的擴繁殖培養過程。旨在繁殖出相當數量的無根苗，最後能達到邊繁殖邊生根的目的。繼代培養的後代是按幾何級數增加的過程。如果以2株苗為基礎，那麼經10代將生成210株苗。
繼代培養中擴繁的方法包括：切割莖段、分離芽叢、分離胚狀體、分離原球莖等。切割莖段常用於有伸長的莖梢、莖節較明顯的培養物。這種方法簡便易行，能保持母種特性。培養基常是MS基本培養基；分離芽叢適於由愈傷組織生出的芽叢。培養基常是分化培養基。若芽叢的芽較小。可先切成芽叢小塊，放入MS培養基中，待到稍大時，再分離開來繼續培養。
增殖使用的培養基對於一種植物來說每次幾乎完全相同，由於培養物在接近最良好的環境條件，營養供應和激素調控下，排除了其他生物的競爭，所以能夠按幾何級數增殖。
在快速繁殖中初代培養只是一個必經的過程，而繼代培養則是經常性不停的進行過程。但在達到相當數量之後，則應考慮使其中一部分轉入生根階段。從某種意義上講，增殖只是儲備母株，而生根才是增殖材料的分流，生產出成品。
3．繼代培養時材料的玻璃化
實踐表明，當植物材料不斷地進行離體繁殖時，有些培養物的嫩莖、葉片往往會呈半透明水跡狀，這種現象通常稱為玻璃化。它的出現會使試管苗生長緩慢、繁殖系數有所下降。玻璃化為試管苗的生理失調症。
因為出現玻璃化的嫩莖不宜誘導生根，因此，使繁殖系數大為降低。在不同的種類、品種間，試管苗的玻璃化程度也有所差異。當培養基上細胞分裂素水平較高時，也容易出現玻璃化現象。在培養基中添加少量聚乙烯醇、脫落酸等物質，能夠在一定程度上減輕玻璃化的現象發生。
呈現玻璃化的試管苗，其莖、葉表面無蠟質，體內的極性化合物水平較高，細胞持水力差，植株蒸騰作用強，無法進行正常移栽。這種情況主要是由於培養容器中空氣濕度過高，透氣性較差造成的，其具體解決的方法為：
a、增加培養基中的 溶質水平，以降低培養基的水勢；
b、減少培養基中含氮化合物的用量；
c、增加光照
d、增加容器通風，最好進行CO2施肥，這對減輕試管苗玻璃化的現象有明顯的作用；
e、降低培養溫度，進行變溫培養，有助於減輕試管苗玻璃化現象發生；
f、降低培養基中細胞分裂素含量，可以考慮加入適量脫落酸。
3．生根培養
當材料增殖到一定數量後，就要使部分培養物分流到生根培養階段。若不能及時將培養物轉到生根培養基上去，就會使久不轉移的苗子發黃老化，或因過分擁擠而使無效苗增多造成拋棄浪費。根培養是使無根苗生根的過程，這個過程目的是使生出的不定根濃密而粗壯。生根培養可採用1/2或者1/4MS培養基，全部去掉細胞分裂素，並加入適量的生長素（NAA、IBA等）。
誘導生根可以採用下列方法
a、將新梢基部浸入50或100*10-6IBA溶液中處理4～8小時；
b、在含有生長素的培養基中培養4～6天
c、直接移入含有生長素的生根培養基中。
上述三種方法均能誘導新梢生根，但前兩種方法對新生根的生長發育則更為有利。而第三種對幼根的生長有抑製作用。其原因是當根原始體形成後較高濃度生長素的繼續存在，則不利於幼根的生長發育。不過這種方法比較可行。
另外也可採用下列方法就可生根。1、延長在增殖培養基中的培養時間；2、有意降低一些增殖倍率，減少細胞分裂素的用量（即將增殖與生根合並為一步）；3、切割粗壯的嫩枝在營養缽中直接生根，此方法則沒有生根階段。可以省去一次培養基製作，切割下的插穗可用生長素溶液浸蘸處理，但這種方法只適於一些容易生根的作物。
另外少數植物生根比較困難時，則需要在培養基中放置濾紙橋，使其略高於液面，靠濾紙的吸水性供應水和營養，從而誘發生根。
從胚狀體發育成的小苗，常常有原先已分化的根，這種根可以不經誘導生根階段而生長。但因經胚狀體發育的苗數特別多，並且個體較小，所以也常需要一個低濃度或沒有植物激素的培養基培養的階段，以便壯苗生根。
試管內生根壯苗的階段，為了成功地將移植到試管外的環境中，以使試管苗適應外界的環境條件。通常不同植物的適宜馴化溫度不同。如菊花，以18～20℃為宜。實踐證明植物生長的溫度過高不但會牽涉到蒸騰加強。而且還牽涉到菌類易滋生的問題。溫度過低使幼苗生長遲緩，或不易成活。春季低溫時苗床可加設電熱線，使基質溫度略高於氣溫2～3℃，這不但有利於生根和促進根系發達，而且有利於提前成活。
移植到試管外的植物苗光強度應比移植前培養有所提高，並可適應強度較高的漫射光，（約4000lx左右），以維持光合作用所需光照強度。但光線過強刺激蒸騰加強，會使水分平衡的矛盾更尖銳。 試管苗移栽是組織培養過程的重要環節，這個工作環節做不好，就會造成前功盡棄。為了做好試管苗的移栽，應該選擇合適的基質，並配合以相應的管理措施，才能確保整個組織培養工作的順利完成。
試管苗由於是在無菌、有營養供給、適宜光照和溫度近100%的相對濕度環境條件下生長的，因此，在生理、形態等方面都與自然條件生長的小苗有著很大的差異。所以必須通過煉苗，例如通過控水、減肥、增光、降溫等措施，使她們逐漸地適應外界環境，從而使生理、形態、組織上發生相應的變化，使之更適合於自然環境，只有這樣才能保證試管苗順利移栽成功。
從葉片上看，試管苗的角質層不發達，葉片通常沒有表皮毛，或僅有較少表皮毛，甚至葉片上出現了大量的水孔，而且，氣孔的數量、大小也往往超過普通苗。由此可知，試管苗更適合於高濕的環境生長，當將它們移栽到試管外環境時，試管苗失水率會很高，非常容易死亡。因此，為了改善試管苗的上述不良生理、形態特點，則必須經過與外界相適應的馴化處理，通常採取的措施有：對外界要增加濕度、減弱光照；對試管內要通透氣體、增施二氧化碳肥料、逐步降低空氣濕度等。
另外，對栽培馴化基質要進行滅菌是因為試管苗在無菌的環境中生長，對外界細菌、真菌的抵禦能力極差。為了提高其成活率，在培養基質中可摻入75%的百菌清可濕性粉劑200～500倍液，以進行滅菌處理。
1．移栽用基質和容器
適合於栽種試管苗的基質要具備透氣性、保濕性和一定的肥力，容易滅菌處理，並不利於雜菌滋生的特點，一般可選用珍珠岩、蛭石、砂子等。為了增加粘著力和一定的肥力可配合草炭土或腐殖土。配時需按比例搭配，一般用珍珠岩、蛭石、草炭土或腐殖土比例為1：1：0.5。也可用砂子：草炭土或腐殖土為1：1。這些介質在使用前應高壓滅菌。或用至少小時烘烤來消滅其中的微生物。要根據不同植物的栽培習性來進行配製，這樣才能獲得滿意的栽培效果。以下介紹幾種常見的試管苗栽培基質。
1．河砂
河砂分為粗砂、細砂兩種類型。粗砂即平常所說的河砂，其顆粒直徑為1～2mm。細砂即通常所說的面砂，其顆粒直徑為0.1～0.2nm。河砂的特點是排水性強，但保水蓄肥能力較差，一般不單獨用來直接栽種試管苗。
2．草炭土
草炭土是由沉積在沼澤中的植物殘骸經過長時間的腐爛所形成，其保水性好，蓄肥能力強，呈中性或微酸性反應，但通常不能單獨用來栽種試管苗，宜與河砂等種類相互混合配成盆土而加以使用。
3．腐殖土
腐殖土是由植物落葉經腐爛所形成。一種是自然形成，一種是人為造成，人工製造時可將秋季的落葉收集起來，然後埋入坑中，灌水保濕的條件下使其風化，然後過篩即可獲得。腐葉上含有大量的礦質營養、有機物質，它通常不能單獨使用。摻有腐殖土的栽培基質有助於植株發根。
4．容器
栽培容器可用6×6cm～10×10cm的軟塑料缽，也可用育苗盤。前者佔地大，耗用大量基質，但幼苗不用移栽，後者需要二次移苗，但省空間、省基質。
2．移栽前的准備
移栽前可將培養物不開口移到自然光照下鍛煉2-3天，讓試管苗接受強光的照射，使其長得壯實起來，然後再開口練苗1-2天，經受較低濕度的處理，以適應將來自然濕度的條件。
3．移栽和幼苗的管理
從試管中取出發根的小苗，用自來水洗掉根部粘著的培養基，要全部除去，以防殘留培養基滋生雜菌。但要輕輕除去，應避免造成傷根。移植時用一個筷子粗的竹簽在基質中插一小孔，然後將小苗插入，注意幼苗較嫩，防止弄傷，栽後把苗周圍基質壓實，栽前基質要澆透水。栽後輕澆薄水。再將苗移入高濕度的環境中。保證空氣濕度達90%以上。
1．保持小苗的水分供需平衡。在移栽後5～7天內，應給予較高的空氣濕度條件，使葉面的水分蒸發減少，盡量接近培養瓶的條件，讓小苗始終保持挺拔的狀態。保持小苗水分供需平衡首先營養缽的培養基質要澆透水，所放置的床面也要澆濕，然後搭設小拱棚，以減少水分的餓蒸發，並且初期要常噴霧處理，保持拱棚薄膜上有水珠出現。當5～7天後，發現小苗有生長趨勢，可逐漸降低濕度，減少噴水次數，將拱棚兩端打開通風，使小苗適應濕度較小的條件。約15天以後揭去拱棚的薄膜，並給予水分控制，逐漸減少澆水，促進小苗長得粗壯。
2．防止菌類滋生。由於試管苗原來的環境是無菌的，移出來以後難以保持完全無菌，因此，應盡量不使菌類大量滋生，以利成活。所以應對基質進行高壓滅菌或鴻烤滅菌。可以適當使用一定濃度的殺菌劑以便有效的保護幼苗，如多菌靈、托布津，濃度800～1000倍，噴葯宜7～10天一次。在移苗時盡量少傷苗，傷口過多，根損傷過多，都是造成死苗的原因。噴水時可加入0.1%的尿素，或用1/2MS大量元素的水溶液作追肥，可加快苗的生長與成活。
3．一定的溫、光條件。試管苗移栽以後要保持一定的溫光條件，適宜的生根溫度是18～20℃，冬春季地溫較低時，可用電熱線來加溫。溫度過低會使幼苗生長遲緩，或不易成活。溫度過高會使水分蒸發，從而使水分平衡受到破壞，並會促使菌類滋生。
另外在光照管理的初期可用較弱的光照，如在小拱棚上加蓋遮陽網或報紙等，以防陽光灼傷小苗和增加水分的蒸發。當小植株有了新的生長時，逐漸加強光照，後期可直接利用自然光照。促進光合產物的積累，增強抗性，促其成活。
4．保持基質適當的通氣性。要選擇適當的顆粒狀基質，保證良好的通氣作用。在管理過程中不要澆水過多，過多的水應迅速瀝除，以利根系呼吸。
綜上所述，試管苗在移栽的過程中，只要把水分平衡、適宜的介質、控制雜菌和適宜的光、溫條件控制好，試管苗是很容易移栽的。
I. 現在需要1.2mg/L的激素KT用於組織培養，我想配50ml,怎麼配置呢然後配置1L的培養基時吸取多少呢
你的意思是在培養基中的最終濃度是1.2mg/L吧？如果是的話就這樣配置：先配置1.2mg/ml的KT母液，這是最終濃度的1000倍，要配50ml就是稱取KT粉末=1.2mg/ml乘以50ml=60mg=0.06gKT粉末，先用1~3ml鹼溶液（1mol/L的氫氧化鉀或氫氧化鈉，KT可不能直接溶於水喲）將稱好的KT粉末完全溶解後，再用水定容至50ml，配製培養基時1L培養基取1ml
KT母液即可。
母液平時不用的時候要保存於4℃