Ⅰ western blot 里5%skim milk怎麼配
最近作了兩次Western blot，不但沒陽性結果，顯色背景都沒有，電泳和轉膜都染過，有條帶。底片和顯色液及DAB顯色液均試過，沒問題。1、檢測GAD--分子量67kd，提取液有蔗糖，其餘同三去污裂解液。蔗糖不會有影響把?樣本--20度放置一周內測。2、一抗放置2年，可能效價不高!用的是 1:100。如果是一抗的原因，不會背景都沒有把?3、第一次有不均勻背景，因為一抗過夜時密封袋不均勻。後兩次無背景顯色。4、封閉液用的是含15%脫脂奶粉TBST，漂洗液用的是含1%BSA的TBST液，TWEEN-20為 0.1%，不會是封閉液的問題吧?
可以在下面幾個問題上找找原因。1. 封閉液用5%Milk，漂洗液(washing buffer 用TBST)2. 看看一抗是否能work，降到1：20。3. 看看二抗是否有問題。
Ⅱ elisa封閉液怎麼配
推薦用tbst進行稀釋獲得5%的牛奶封閉液（5g/100ml）。
很多人的經驗是：脫脂牛奶封閉後背景比較干凈，而檢測磷酸化蛋白則用bsa（因脫脂牛奶含有較多的磷酸化蛋白，會干擾的）
Ⅲ 奶粉一勺5克左右,水比例1比7,那水要多少毫升
要35毫升。按要求5克奶粉按1:7比倒需水35克，水的比重是1克/亳升，正好35毫升。
Ⅳ 配wb脫脂奶粉封閉液是用tbst還是tbs
用加脫脂奶粉封閉液用TBST液顯色用紅外熒光二抗則能用TBS液稀釋
Ⅳ southern blot 牛奶封閉液如何配置
Southern Blot 為什麼要配牛奶封閉液啊？是最後孵育的一部要加抗體嗎？
如果是封閉抗體的話，一般就配5%的脫脂奶粉，5%多半指的是個g/100ml。也就是5g奶粉，100ml水的比例，完全溶解即可。如果擔心牛奶裡面有小顆粒沒有溶解，可以用0.22um的膜過濾一下，防止有顆粒在膜上形成斑點的背景。
Ⅵ western牛奶封閉液怎麼配
推薦用TBST進行稀釋獲得5%的牛奶封閉液（5g/100mL）。
拓展：
一、牛血清白蛋白(BSA)，又稱第五組分，是牛血清中的一種白蛋白，包含583個氨基酸殘基，分子量為66.430 kDa，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用，例如在western blot中作為Blocking agent;在酶切反應緩沖液中加入BSA，通過提高溶液中蛋白質的濃度，對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附，能減輕有些酶的變性，能減輕有些不利環境因素如加熱，表面張力及化學因素引起的變性。
二、用途說明
1、 在酶切反應緩沖液中加入BSA，通過提高溶液中蛋白質的濃度，對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附，能減輕有些酶的變性，減輕不利環境因素如加熱，表面張力及化學因素引起的變性的。
2 、ELISA中也常常用到，比如封閉液，樣本稀釋液，酶結合物稀釋液都可以用BSA。
3、生化研究，遺傳工程和葯物研究。
Ⅶ 5量匙奶粉是約幾勺、加180毫升的水美素佳兒
您好，一般來說的話 ，大多數奶粉是一平勺加30毫升的水的 ，但是具體的還是需要看罐體上面的喂養說明的哦